بيان دگرساخت ژن لينالول سنتاز در مخمر ساكارومايسس سرويزيه با استفاده از تكنيك ترميم شكاف

Heterologous expression of linal ool synthase in Saccharomyces cerevisiae using gap repair technique

مونوترپنوئيد ها يك گروه متنوع از متابوليت هاي ثانويه هستند كه بيش تر در بافت هاي گياهي يافت مي شوند. از اين تركيبات به طور گسترده اي در صنايع غذايي و آرايشي استفاده مي شود. ساكارومايسس سرويزيه به طور طبيعي حاوي پيش ساز مورد نياز سنتز ترپنوئيد ها است و بنابراين مي تواند به عنوان كارخانه سلولي براي توليد دگرساخت اين تركيبات به كار رود. در سال هاي اخير تعداد زيادي از ژن هاي رمزگذار مونوترپن سنتاز هاي گياهي (MTS) شناسايي شده اند. در اين مطالعه براي توليد لينالول در مخمر ساكارومايسس سرويزيه، توالي ژن رمزگذار لينالول سنتاز از گياه اسطوخودوس با استفاده از تكنيك ترميم شكاف، در پلاسميد pESC-URA تحت كنترل پيش بر GAL1 همسانه سازي شد. سويه مخمري حاصل YLIS ناميده شد. توليد لينالول در اين سويه با استفاده از كروماتوگرافي گازي (GC) تاييد شد. ميزان سنتز لينالول در سويه YLIS با استفاده از منحني لينالول استاندارد 32 ميكروگرم در ليتر تخمين زده شد.

Monoterpenoids are a diverse group of secondary metabolites usually found in plant tissue. These compounds are widely used as aromatic additives in cosmetics and food industry. Saccharomyces cerevisiae naturally contains the necessary precursors for the synthesis of terpenoids and therefore can be used as a cell factory for heterologous production of these compounds. In recent years, many genes that encode plant monoterpene synthases (MTS), have been characterized. In this study, in order to produce linalool in yeast Saccharomyces cerevisiae, the sequence of gene encoding linalool synthase from lavender was cloned in the pESC-URA under the control of GAL1 promoter, by using gap repair technique. The resultant yeast strain was named YLIS. The production of linalool in this strain was confirmed by gas choromatography (GC). Using standard curve, the concentration of linalool in YLIS strain was estimated 32 μg/L.