اثر سيلي مارين بر ذخيره سازي مني خروس در دماي °C 4

Effect of silymarin on rooster semen during storage at 4 °C

زمينه مطالعاتي: سيلي مارين يك پلي فنل است كه توانايي خنثي سازي راديكال هاي آزاد اكسيژن را دارد و مي تواند در ذخيره سازي اسپرم مفيد باشد. هدف: اين آزمايش به منظور بررسي اثر سيلي مارين بر ذخيره سازي اسپرم خروس در °C4 انجام شد. روش كار: جمع آوري مني دو بار در هفته در 5 نوبت از 15 قطعه خروس بالغ انجام شد. انزال ها در هر نوبت بعد از تجميع به پنج قسمت تقسيم شد. مقدار صفر (شاهد،S0)، 50 (S50)، 100 (S100)،150 (S150) و 200 (S200) ميكروگرم در ميلي ليتر سيلي مارين به هر قسمت اضافه شد. سپس نمونه ها تا °C 4 سرد شد و به مدت 72 ساعت در اين دما نگهداري شد. در زمان هاي صفر، 24، 48 و 72 ساعت ذخيره سازي، سلامت غشاي پلاسمايي، زنده ماني (رنگ آميزي هوخست 33258) و تحرك اسپرم ارزيابي شد. در زمان 48 به منظور بررسي پراكسيداسيون چربي غلظت مالون دي آلدهيد (MDA) در (106× 300) اسپرم اندازه گيري شد. نتايج: اثر متقابل سيلي مارين و زمان ذخيره سازي بر سلامت غشاي پلاسمايي، زنده ماني و تحرك پيش رونده اسپرم معني دار بود (05/0P<). در ساعت 48 و 72، به ترتيب بيشترين تحرك پيش رونده اسپرم در S50 (20/59%) يا S100 (20/61%) و S100 (00/52%) و بيشترين سلامت غشاي پلاسمايي اسپرم به ترتيب در S50 (12/68%) يا S100 (32/68%) و S100 (50/62%) مشاهده شد (05/0P<). بيشترين زنده ماني اسپرم در زمان هاي 48 و 72 به ترتيب در S50 (به ترتيب 50/71% و 94/59%) و S100 (به ترتيب 56/71% و 48/62%) مشاهده شد (05/0P<). بيشترين ميزان توليد MDA (µM/mL 12/1) و كمترين (µM/mL 59/0) به ترتيب در S200 و S100 مشاهده شد (05/0P<). نتيجه گيري نهايي: افزودن µg/mL 100 سيلي مارين به مني سبب بهبود ماندگاري اسپرم خروس در °C 4 مي شود.

BACKGROUND: Silymarin is a polyphenol, which has scavenging ability of reactive oxygen species, and it can improve spermatozoa storage. OBJECTIVES: Experiment was conducted to evaluate the effect of silymarin on rooster sperm storage at 4 C. METHODS: Semen collection was performed twice a week in 5 times by using 15 mature roosters. In each session, ejaculates were pooled and split into five parts. The amount of 0 (S0), 50 (S50), 100 (S100), 150 (S150) and 200 (S200) μg/mL silymarin were added to each part. After that, samples were chilled to 4 OC and kept until 72 h. Sperm viability (by staining Hoechst 33258), motility and functional membrane integrity were evaluated at 0, 24, 48 and 72 h. To assay lipid peroxidation, the concentration of malondialdehyde (MDA) was determined by 300106 spermatozoa at 48 h. RESULTS: There was interaction between silymarin and storage time on sperm motility, viability and functional membrane integrity (P<0.05). At 48 and 72 h, the highest of sperm motility (59.20% or 61.20% and 52.00%, respectively), and functional membrane integrity (68.12% or 68.32% and 62.50%, respectively) were observed by S50 or S100 and S100, respectively (P<0.05). The highest of sperm viability was observed by S50 (71/50% and 59/94% respectively) and S100 (71/56% and 62/48% respectively) at 48 and 72 h, respectively (P<0.05). The concentration of MDA was highest (1.12 μM/mL) and lowest (0.59 μM/mL) in S200 and S100, respectively (P<0.05). CONCLUSIONS: The addition of 100 μg/mL silymarin to semen improves longevity of rooster spermatozoa at 4C.