بررسي اثر سميت سلولي و آنتي اكسيداني كرايزين بر سلول هاي بنيادي اسپرماتوگوني جداشده از نوزاد موش كوچك آزمايشگاهي

Cytotoxic and antioxidant effect of chrysin on neonate mouse spermatogenic stem cells

سابقه و هدف: تاكنون گياهان زيادي در درمان ناباروري مورد استفاده قرار گرفته ­اند. مطالعات نشان داده­اند كه كرايزين به ­عنوان يك متابوليت فعال موجود در شهد برخي گياهان عملكرد توليد مثلي حيوانات را بهبود مي­ بخشد. بنابراين، هدف اين پژوهش بررسي اثر كرايزين بر روي سلول ­هاي بنيادي اسپرم­ساز موش كوچك آزمايشگاهي است. مواد و روش ­ها: در اين پژوهش تجربي سلول­ هاي بنيادي اسپرماتوگوني موش سوري در محيط DMEM/F12 كشت شده با غلظت­ هاي مختلف كرايزين (2/5، 5، 10، 20 و 40 ميكروگرم بر ميلي­ ليتر) به ­مدت 6 و 12 روز تيمار شدند. سپس، سميت توسط آزمون­ هاي MTT، اكردين اورنج/ پروپوديوم ايدايد، DAPI و ظرفيت آنتي ­اكسيداني توسط آزمون DCF-DA مورد بررسي قرار گرفت. نتايج: كرايزين در غلظت­ هاي زير 5 ميكروگرم سميت معني ­داري بر سلول­ هاي بنيادي اسپرم ­ساز اعمال نكرد (0/05P* و ۰/۰۰۱>P***) و در روز 12 به ميزان 44، 56 و 65 درصد كاهش معني­ دار يافت (0/05>P<0/01

Background: So far, many plants have been used for the treatment of infertility. Several studies have revealed that chrysin (as an active metabolite) improves animals' reproduction. Therefore, the objective of this study was to evaluate the effect of chrysin on Balb/C mice spermatogenic stem cells. Materials and Methods: In this in vitro experimental study Balb/C neonate spermatogonia stem cells cultured in DMEM-F12 medium were treated with various concentrations of chrysin (2.5, 5, 10, 20, 40 μg/ml) for 6 and 12 days. Then the cytotoxicity was assessed using MTT, Akredin orange/Propodium Idid, DAPI and antioxidant concentration DCF-DA tests. Results: Chrysin showed no remarkable cytoxicity in concentrations less than 5 μg/ml. While, after 6 days the viability of cells treated with chrysin 10, 20 and 40 μg/ml was decreased to 30, 45 and 56 % (P<0.05 and P<0.001, respectiely); after 12 days the viability of cells was decreased to 44, 56 and 65 % (P<0.05, P<0.01 and P<0.001, respectiely). DCFDA results revealed a 80 % antioxidant capacity of chrysin in 5 and 2.5μg/ml concentrations. Conclusion: Lower concentrations of chrysin has protective effect on Balb/C mice spermatogenic through improving cell viability, decreasing cells apoptosis and inhibiting free radicals.