اثر ليپوپلي ساكاريد باكتري اشرشيا كولي بر پاسخ ايمني هومورال ماكيان

Effects of Escherichia coli Lipopolysaccharide on Chicken Humoral Immune Response

در اين مطالعه جداسازي، خالص سازي و غيرفعال نمودن پلي ساكاريد باكتري اشرشيا كولي با هدف بررسي اثر ليپوپلي ساكاريد (LPS) فعال و غيرفعال در تحريك پاسخ هومورال ماكيان انجام شده است. همچنين امكان استفاده از اين قسمت ديواره خارجي در تحريك اختصاصي سيستم ايمني هومورال نسبت به باكتري منبع آن ارزيابي شده است. جداسازي ليپوپلي ساكاريد با استفاده از اتيلن دي آمين تترا استيك اسيد (EDTA) انجام شد. چهار دوز از LPS فعال و غير فعال شامل 10، 25، 50 و 100 ميكروگرم به همراه 100 ميكروليتر از گلبول قرمز گوسفند (SRBC) 20 درصد به هشت گروه شامل چهار قطعه مرغ تزريق شد. پاسخ ايمني هومورال در روزهاي ۵ و 10 پس از تيمار، با روش معمول هماگلوتيناسيون بررسي شد. اثر LPS در ايجاد پاسخ ايمني هومورال نسبت به باكتري منبع با روش اليزاي خانگي ارزيابي شد. تزريق دوزهاي 10 و 25 ميكروگرم از ليپوپلي ساكاريد باكتري اشرشيا كولي به صورت معناداري (P<0.05) سبب تحريك پاسخ ايمني هومورال شد. ليپوپلي ساكاريد غير فعال 10 روز پس از تزريق ميزان 100 ميكروگرم، سبب افزايش غير معنادار عيار آنتي بادي شد. همچنين تفاوت معناداري (P<0.05) در تغيير عيار آنتي بادي نسبت به باكتري اشرشيا كولي در گروه هاي مختلف وجود نداشت. امكان بهره مندي از ليپوپلي ساكاريد باكتري اشرشيا كولي در ايمن سازي ماكيان وجود دارد؛ همچنين بررسي اثرات جانبي و تغيير روش هاي غيرفعال سازي مي تواند زمينه استفاده از LPS را در ايمن سازي حيوانات فراهم كند. علاوه بر اين استفاده از LPS اشريشيا كولي قادر به تحريك سيستم ايمني عليه اين باكتري نبود.

In this research، extraction، purification and inactivation of Escherichia coli (E. coli) lipopolysaccharide (LPS) were performed with the aim of investigating the effects of inactivated and intact form of LPS on chicken humoral immune response stimulation. Also، the possibility of application of this outer part of cell wall for specific induction of humoral immune response to its reference bacteria was evaluated. The LPS was extracted using Ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA). Four doses (10، 25، 50 and 100 µg) of inactivated and intact form of LPS and 100 µL of %20 sheep red blood cell (SRBC) were injected to eight groups of broiler chickens (N=4). The humoral immune responses were evaluated five and 10 days after treatment by haemagglutination assay. The effects of LPS on induction of humoral immune response to the reference bacteria were measured using in-house ELISA. Injection of 10 and 25 µg of LPS significantly (P<0.05) induced the humoral immune response. The inactivated LPS only induced immune responses 10 days after the injection of 100 µg. No significant difference existed between the various groups in antibody titer against E. coli (P<0.05). It is possible to take advantage from Escherichia coli lipopolysaccharide in poultry immunization. Also، evaluation of the side effects and changes of inactivation methods may show the capability of LPS application in animal immunization. In addition، using LPS as a vaccine for E. coli is not suggested.