ذخيره سازي مني خروس به صورت مايع با استفاده از عصاره الكلي رزماري

Storage of rooster semen in liquid form using alcoholic extract of rosemary

اين آزمايش براي بررسي عصاره الكلي برگ رزماري بر ذخيره سازي اسپرم خروس در °C 4 آزمايشي با استفاده از هشت قطعه خروس بالغ انجام شد. گرد آوري مني سه روز يك بار در پنج نوبت انجام شد. انزال ها در هر نوبت پس از تجميع به شش قسمت تقسيم و مقدار 0 (R0)، 10 (R10)، 20(R20)،30 (R40)، 40 و 50 (R50) ميكروگرم عصاره الكلي رزماري در ميلي ليتر به هر قسمت اضافه شد. سپس نمونه ها تا °C 4 سرد شد و به مدت 72 ساعت در اين دما نگهداري شد. در زمان هاي 0 (T0)، 24 (T24)، 48 (T48) و 72 (T72) ساعت ذخيره سازي، سلامت غشاي پلاسمايي، زنده ماني (رنگ آميزي هوخست 33258) و تحرك اسپرم ارزيابي شد. در زمان 48 به منظور بررسي پراكسيداسيون چربي، غلظت مالون دي آلدهيد (MDA) در يك ميليون اسپرم اندازه گيري شد. نتايج نشان داد، غلظت MDA در تيمار R50 (0.93 nMكمتر از شاهد (1.15 nM) و بيشتر از R40 (0.82 nM بود (05/0>P). سلامت غشاي پلاسمايي و زنده ماني اسپرم در غلظت هاي µg/mL 40 عصاره الكلي رزماري (به ترتيب ۷۵/۷۲درصد و ۷۳/۵۶درصد) از غلظت هاي 0 (به ترتيب ۷۰/۶۰درصد و ۶۹/۰۸درصد) و µg/mL 10 (به ترتيب۷۱/۵۶درصد و۶۹/۷۲درصد ) عصاره بيشتر بود (05/0>P). اثر متقابل عصاره الكلي رزماري و زمان ذخيره سازي بر تحرك پيش رونده اسپرم خروس معني دار بود (05/0>P). پس از 72 ساعت، تحرك پيش رونده اسپرم در تيمار R40 (46% بيشتر از تيمارهاي R0 (34%)، R10 (35.6%) و R20 (38.8% بود (05/0>P). بنابراين عصاره الكلي رزماري سبب بهبود كيفيت اسپرم خروس طي ذخيره سازي در °C 4 شد.

Current experiment was conducted to evaluate the effect of alcoholic extract of rosemary leaves on rooster sperm storage at 4 °C by using eight mature roosters. Semen collection was performed three days’ interval in 5 times. In each session، ejaculates were pooled، split into six parts and the amounts of 0 (R0)، 10(R10)، 20 (R20)، 30 (R30)، 40 (R40) and 50 µg/mL (R50) of rosemary extract were added to each part. After that، samples were chilled to 4 ℃ and kept until 72 h. Sperm viability (by staining Hoechst 33258)، motility and functional membrane integrity were evaluated at 0 (T0)، 24 (T24)، 48 (T48) and 72 h (T72). Concentration of malondialdehyde (MDA) was determined to assay lipid peroxidation by one million spermatozoa at 48 h. The results showed that the concentration of MDA was lower in R50 (0.93 nM) than control (1.15 nM)، but، it was higher than R40 (0.82 nM، P<0.05). Membrane integrity and sperm viability were higher in 40 µg/mL rosemary extract (75.72% and 73.56%، respectively) than control (70.6% and 69.08%، respectively) and 10 µg/mL extract (71.56% and 69.72%، respectively; P<0.05). There was interaction between rosemary extract and storage time on sperm motility (P<0.05). After 72 h، sperm motility was higher R40 (46%) than R0 (34%)، R10 (35.6%) and R20 (38.8%، P<0.05). Therefore، rosemary extract improves quality of rooster spermatozoa during storage at 4 °C.