بررسي خصوصيات ضد ميكروبي برخي سويه هاي Streptomyces دريايي بر عليه سه بيمارگر گياهي

Evaluation of antimicrobial activity some of marine Streptomyces sp. against three plant pathogens

در سال هاي اخير، استفاده از متابوليت هاي ثانويه مانند آنتي بيوتيك ها به منظور كنترل زيستي عوامل بيماريزاي گياهي مورد توجه قرار گرفته است. اين پژوهش با هدف جداسازي، شناسايي و بررسي فعاليت ضدميكروبي جدايه هايي از Streptomyces از درياي عمان عليه سه بيمارگر گياهي Fusarium oxysporum، Xanthomonas campestris و Erwinia amylovora اجرا شد. سويه هاي Streptomyces روي محيط كشت هاي نشاسته كازيين اگار، گليسرول گليسين آگار و نشاسته نيترات آگار در غلظت هاي نمكي متفاوت جداسازي شدند. فعاليت ضدميكروبي سويه ها با استفاده از كشت تقاطعي و اندازه گيري هاله عدم رشد در برابر بيمارگرهاي گياهي اندازه گيري شد. 90% اين سويه ها قادر به توليد هاله مهاركنندگي رشد در برابر باكتري X. campestris بودند كه بالاترين هاله 1±15 ميلي متر به دست آمد. دو سويه 130AC و 275AC براي استخراج تركيب ضدميكروبي انتخاب شدند. اين سويه ها در محيط هاي پيش كشت و تخميري مختلفي كشت داده شدند. استفاده از محيط هاي تخميري مختلف نشان مي دهد كه محيط داراي گليسرول و سويا هاله بازدارندگي را افزايش مي دهد. سويه هاي به دست آمده براساس ژن SrRNA16 متعلق به گونه هايStreptomyces sp. مي باشند. جهت استخراج تركيب ضدميكروبي از حلال آلي دي كلرومتان، كلروفرم و اتيل استات استفاده گرديد. حلال دي كلرومتان در سويه 130 ACو كلروفرم در سويه 275AC با ايجاد هاله مهاركنندگي 21 و 25 ميلي متر موثرتر از ساير حلال ها بودند. اين مطالعه نشان مي دهد كه برخي جدايه هاي Streptomyces در محيط هاي دريايي كمتر كاوش شده، داراي قابليت كنترل باكتري هاي بيماريزاي گياهي مي باشند كه مي توانند مورد استفاده قرار گيرند.

In recent years، application of secondary metabolites such as antibiotics has been considered as a biological control method for plant pathogens. This study aimed to isolate، identify and evaluate the antimicrobial activity of Streptomyces species in Oman Sea against three plant pathogens including Fusarium oxysporum، Xanthomonas campestris and Erwinia amylovora. The Streptomyces strains were isolated on different media including starch casein agar، glycerol glycine agar and starch nitrate agar with different NaCl concentration. Preliminary antimicrobial activity was investigated using cross streak method and evaluated by measuring the zone of growth inhibition against plant pathogens. Ninety percent of the strains were able to inhibit the growth of X. campestris strain and the highest inhibition zone was 15±1 mm. Two strains، AC275 and AC130 were selected to extract the antimicrobial compound. The isolates were cultured in different seed cultures and fermentation media. The application of different fermentation media shows that glycerol and soybeans cultures increase inhibition zone. Based on 16S rRNA gene analysis، two strains were belonged to Streptomyces sp. The organic solvents including dichloromethane، chloroform and ethyl acetate were used in order to extract the antimicrobial compound. Dichloromethane in AC130 and chloroform in AC275 were more effective than other solvents by creating an inhibition zone of 21 and 25 mm respectively. This study shows that the Streptomyces species in less explored marine environment have the ability to control plant pathogenic bacteria.