اثر محيط كشت حاصل از سلولهاي بنيادي مزانشيميمغز استخوان در درمان ناباروري آزواسپرميك القاء شده به وسيله بوسولفان در موش بالب– سي

The Effect of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell Culture in the Treatment of Azoospermic Infertility induced by Busulfan Balb / C mice

چكیده زمینه و هدف: تجویز داروهای شیمی‌درمانی در بیماران مبتلا به سرطان می‌تواند زمینه‌ساز ناباروری باشد، لذا این مطالعه با هدف بررسی اثر محیط استفاده شده در كشت سلول‌های بنیادی مزانشیمی‌مغز استخوان(سیكریتا) در درمان ناباروری آزواسپرمیك القاء شده به وسیله بوسولفان در موش بالب‌ـ سی انجام گردید.   روش بررسی: در این مطالعه تجربی، 18 سر موش سوری از نژاد بالب - سی به صورت تصادفی به سه گروه كنترل، آزواسپرمی ‌و سیكریتا تقسیم شدند. حیوانات گروه كنترل هیچ‌گونه تیمار دارویی دریافت نكردند. برای توقف اسپرماتوژنز و القای آزواسپرمی‌دو دوز بوسولفان(10 میلی گرم بر كیلوگرم وزن بدن) با فاصله 21 روز به موش‌های گروه آزواسپرمی‌و سیكریتا تزریق شد. 35 روز بعد از آخرین تزریق بوسولفان، محیط استفاده شده در كشت سلول‌های بنیادی مزانشیمی ‌مغز استخوان به درون بیضه موش‌های گروه سیكریتا تزریق گردید. هشت هفته پس از تزریق محیط كشت، بیضه‌های تمامی‌حیوانات جدا گردید و تحت بررسی هیستولوژیك و هیستوموفومتریك قرار گرفتند. داده‌ها با استفاده از آزمون واریانس یك طرفه مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.   یافته‌ها: یافته‌های هیستولوژیك نشان داد، در گروه آزواسپرمی، سلول‌های اسپرماتوژنیك به شدت كاهش یافته بود و فضاهای واكوئله در اپیتلیوم زایا مشاهده گردید. پس از درمان با سیكریتا بهبود لایه اپیتلیوم زایا و فرایند اسپرماتوژنز مشاهده شد. هم‌چنین یافته‌های هیستومورفومتریك نشان داد كه ضخامت و مساحت سلولی، قطر كلی، مساحت مقطع عرضی و شاخص اسپرماتوژنز لوله‏های منی‏ساز در گروه سیكریتا نسبت به گروه آزواسپرمی‌‏افزایش داشت(001/0p<)، اما نسبت به گروه كنترل كاهش نشان داد(05/0p<). هم‌چنین تعداد و تراكم عددی لوله‏های منی‏ساز در گروه كنترل و سیكریتا نسبت به گروه آزواسپرمی ‌‏كاهش داشت (001/0p<)، در هر سه گروه، قطر و مساحت لومنی لوله‌های منی‌ساز اختلاف معنی‏داری نداشتند(05/0p>).     نتیجه‌گیری: محیط استفاده شده در كشت سلول‌های بنیادی مزانشیمی ‌مغز استخوان(سیكریتا) می‌تواند موجب بازگشت اسپرماتوژنز در موش‌های آزواسپرمیك القاء شده به وسیله بوسولفان شود. این یافته‌ها می‌تواند به یافته‌های پیشین در درمان ناباروری جنس نر اضافه گردند.    

Abstract   Background & aim: Prescribing chemotherapy drugs in patients with cancer can be the mainstay of infertility. Therefore, the aim of this study was to investigate The Effect of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell Culture in the Treatment of Azoospermic Infertility induced by Busulfan Balb / C mice  Abstract   Background & aim: Prescribing chemotherapy drugs in patients with cancer can be the mainstay of infertility. Therefore, the aim of this study was to investigate The Effect of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell Culture in the Treatment of Azoospermic Infertility induced by Busulfan Balb / C mice   Methods: In this experimental study, 18 mice of Balb-C race were randomly divided into control, azoospermic and secreta groups. The animals in the control group did not receive any drug treatment. To stop spermatogenesis and induction of azospermide, a dose of busulfan (10 mg / kg body weight) was injected to azoospermic and cyclic rats at intervals of 21 days. 35 days after the last injection of busulfan, the medium used for the culture of mesenchymal stem cells of the bone marrow was injected into the testis of the rat secreta group. Eight weeks after inoculation, the testicles of all animals were separated and histologically and histomorphologically examined. Data were analyzed by one-way ANOVA.   Results: Histologic findings showed that in the azoospermic group, the spermatogenic cells were significantly reduced, and the vacuoles were observed in the germinal epithelium. After treatment with secreta, the epithelium and spermatogenesis were observed. Also, histomorphometric findings showed that cell thickness and area, total diameter, cross-sectional area and spermatogenesis index of seminal tubes were increased in the secreta group compared to the azoospermic group (p <0.001), but decreased compared to the control group (P <0.05). Also, the number and density of seminal tube in control group and secreta decreased compared to Azospermic group (p <0.001). There was no significant difference between lumen diameter and area of ​​menises in all three groups (p>0.05).   Conclusion: The media used in the cultivation of bone marrow mesenchymal stem cells (Secreta) can cause spermatogenesis back in busulfan-induced azoospermic mice. These findings can be attributed to previous findings in male infertility treatment.   Methods: In this experimental study, 18 mice of Balb-C race were randomly divided into control, azoospermic and secreta groups. The animals in the control group did not receive any drug treatment. To stop spermatogenesis and induction of azospermide, a dose of busulfan (10 mg / kg body weight) was injected to azoospermic and cyclic rats at intervals of 21 days. 35 days after the last injection of busulfan, the medium used for the culture of mesenchymal stem cells of the bone marrow was injected into the testis of the rat secreta group. Eight weeks after inoculation, the testicles of all animals were separated and histologically and histomorphologically examined. Data were analyzed by one-way ANOVA.   Results: Histologic findings showed that in the azoospermic group, the spermatogenic cells were significantly reduced, and the vacuoles were observed in the germinal epithelium. After treatment with secreta, the epithelium and spermatogenesis were observed. Also, histomorphometric findings showed that cell thickness and area, total diameter, cross-sectional area and spermatogenesis index of seminal tubes were increased in the secreta group compared to the azoospermic group (p <0.001), but decreased compared to the control group (P <0.05). Also, the number and density of seminal tube in control group and secreta decreased compared to Azospermic group (p <0.001). There was no significant difference between lumen diameter and area of ​​menises in all three groups (p>0.05).   Conclusion: The media used in the cultivation of bone marrow mesenchymal stem cells (Secreta) can cause spermatogenesis back in busulfan-induced azoospermic mice. These findings can be attributed to previous findings in male infertility treatment.