اثر اگزندين 4 بر فعاليت حياتي، توليد نيتريك اكسايد وTNF-α در كشت ماكروفاژ صفاقي موش C57BL/6

مقدمه و هدف: پپتيد مشابه گلوكاگون-1 پپتيد كوچكي است كه در روده توليد شده و عملكرد اصلي آن، تحريك ترشح انسولين است؛ ولي گيرنده آن در بسياري سلول‌ها ازجمله ماكروفاژهاي انساني و موشي وجود دارد. ماكروفاژها با توجه به عملكردهاي متنوعي كه دارند، در تنظيم فرايندهاي پيش‌التهابي و پاسخ‌هاي سيستم ايمني بسيار موثرند. در اين مطالعه اثر اگزندين 4 كه آنالوگ GLP-1 است، بر فعاليت حياتي، توليد نيتريك اكسايد و TNF-? ماكروفاژهاي صفاقي بررسي شده است. مواد و روش‌ها: ماكروفاژهاي صفاقي از موش C57BL/6 جدا شده و در 2 گروه تحريك شده با LPS و بدون تحريك به مدت 24 ساعت كشت شده و غلظت‌هاي 3-??/0 نانومولار Exendin-4 را دريافت كردند. فعاليت حياتي به روش MTT، نيتريت به روش گريس و TNF-? با الايزا سنجيده شد. نتايج: Exendin-4 در غلظت‌هاي 3 و ?/? نانومولار با اثر بر ماكروفاژهاي (درحال استراحت) موجب كاهش معنادار MTT و در ماكروفاژهاي تحريك‌شده با LPS در غلظت 3 نانومولار، موجب افزايش فعاليت مي‌شود. غلظت‌هاي ?/? و ??/0 نانومولار Exendin-4 در ماكروفاژهاي درحال استراحت موجب كاهش نيتريت مي‌شود؛ اما در 3 نانومولار توليد نيتريت را در ماكروفاژهاي تحريك‌شده افزايش مي‌دهد. همچنين افزايش توليد TNF-? در غلظت‌هاي 3 و 1 نانومولار Exendin-4 در ماكروفاژهاي تحريكشده و در 3 نانومولار در ماكروفاژ در حال استراحت مشاهده مي‌شود. نتيجه‌گيري: تاثير Exendin-4 بر توليد نيتريت و TNF در شرايط in vitro، علاوه بر غلظت آن به وضعيت سلول از نظر تحريك نيز بستگي دارد و ممكن است به جاي اثر ضدالتهابي، موجب تشديد التهاب گردد.

Background and Objective: Glucagon like peptide 1 (GLP-1) is a peptide released from the small intestine and mainly enhances glucose-induced insulin secretion, although its receptor (GLP-1R) is distributed on various cells including mice and human macrophages. Regarding important functions of macrophage in regulating pro-inflammatory and immune responses, in this study, the effect of exendin-4 (an analog of GLP-1) on vital activity, nitric oxide and TNF-? production of peritoneal macrophages was investigated. Materials and Methods: Peritoneal macrophages were isolated from C57BL/6 mice and cultured with or without LPS for 24 hours and 0.03 to 3 nM exendin-4. The vital activity was evaluated by MTT, nitrite by Griess method and TNF-? by ELISA. Results: Exendin-4 at 3 and 0.3 nM significantly reduced MTT of macrophages (resting), but increased it in stimulated macrophages at 3 nM. Exendin-4 at 0.3 and 0.03 nM reduced nitrite in resting macrophages, although it (3 nM) induced an increase in LPS stimulated macrophages. An increase in TNF-? production of and resting (3 nM) and stimulated macrophages (1 and 3 nM) was also observed. Conclusion: The effect of exendin-4 on nitrite and TNF production of macrophages in vitro is dependent on the cell status of activation (besides its concentration) and it may function as pro- or anti-inflammatory.