بهينه‌سازي زيست پالايي نفت خام توسط باكتري Alcanivorax dieselolei در محيط آبي با استفاده از روش تاگوچي

Optimization of Crude Oil Bioremediation by Alcanivorax dieselolei in Aquatic Medium Using Taguchi Method

وارد شدن نفت و پساب‌هاي نفتي به درياها آسيب‌هاي جدي به حيات آبزيان وارد مي‌كند. علاوه بر آن اين تركيبات در بافت‌هاي بدن آبزيان تجمع يافته و سلامت انسان‌ها را تهديد مي كنند، در نتيجه توسعه روش‌هاي كارآمد جهت تصفيه اين مواد حائز اهميت است. در اين پژوهش براي ارزيابي كارايي فرآيند پاكسازي زيستي، از رسوبات و آب مناطق مختلف در سواحل خليج فارس در مجاورت شهر بندر عباس نمونه‌برداري و پس از غني‌سازي، كارآمدترين باكتري تجزيه كننده نفت خام جداسازي، خالص و توسط روش‌هاي مولكولي (S rDNA 16) و بيوشيميايي شناسايي شد. به منظور تعيين شرايط بهينه تجزيه‌زيستي نفت خام توسط سويه جداسازي شده فاكتورهاي pH، دما، تعداد باكتري تلقيح شده، غلظت NH4Cl و K2HPO4 با استفاده از طراحي آزمايش به روش تاگوچي با آرايه (L16 (45 (پنج فاكتور هر كدام در چهار سطح) بهينه‌سازي شدند. سويه خالص شده در اين مطالعه TA1 نام‌گذاري و بر اساس آناليز مولكولي 99% به Alcanivorax dieseloleiشباهت نشان داد. از ميان فاكتورهاي بهينه شده pH و دما تاثير گذارترين فاكتورها در تجزيه زيستي نفت خام بودند. 9=pH، C° 35 = دما، (اg/L 1) NH4Cl، (اg/L 25/0) K2HPO4 و 1/0= مايه تلقيح (OD600nm) به عنوان شرايط بهينه در نظر گرفته شد. تحت اين شرايط بيش از 80% نفت خام تجزيه گرديد. با توجه به توان بالاي سويه خالص شده در تجزيه نفت خام و تعيين شرايط بهينه تجزيه زيستي، نتايج اين مطالعه مي تواند در زيست‌پالايي مناطق آلوده به تركيبات نفتي در منطقه استفاده شود.

Seeping oil and oily waste into the seas can cause serious damage to aquatic life. These compounds tend to bioaccumulate and threaten human health, Therefore, it is important to develop efficient methods for the treatment of these compounds. In this study, sediment and water from different regions of the Persian Gulf (Bandar Abbas) were sampled and enriched in mineral salt medium. The most efficient crude oil degrading bacteria was purified and then identified by molecular (16S rDNA) and biochemical analysis. The Taguchi experimental design L16 (45) was used to optimize the biodegradation process of crude oil by the isolated strain. This investigation applied the parameters of pH, temperature, optical density and concentration of NH4Cl and K2HPO4. The results showed that isolated strain had 99% similarity to Alcanivorax dieselolei and named TA1. Temperature and pH had the greatest influence on crude oil biodegradation. Maximum biodegradation efficiency was predicted to occur at pH= 9, temperature = 35 ͦC, NH4Cl (g/L)= 1, K2HPO4 (g/L)= 0.25 and optical density (OD)= 0.1. Under these conditions more than 80% of crude oil was degraded. Due to high ability of isolated strain to degrade crude oil, the results of this study can be used in the bioremediation of petroleum contaminated soil in the studied area.