جداسازي و تعيين خصوصيات مورفولوژيكي و دامنه ميزباني باكتريوفاژهاي ايراني عليه جدايه هاي كلكسيون رفرانس سالمونلا

Isolation, morphological characterization and host range determination of Iranian bacteriophages against Salmonella reference collection

چكيده زمينه و هدف: باكتري سالمونلا در پزشكي حايز اهميت مي باشد. اغلب عفونت هاي مرتبط با اين باكتري ها خود محدود شونده مي باشند. آنتي بيوتيك ها براي بيماران در معرض خطر مانند كودكان، افراد مسن و بيماران داراي ضعف ايمني تجويز مي شود. مصرف بيش از حد آنتي بيوتيك ها منجر به افزايش باكتري هاي داراي مقاومت چند دارويي شده است كه تهديد كننده حيات مي-باشند. فاژ تراپي يكي از راه هاي جايگزين در جهت كاهش آنتي بيوتيك است. روش بررسي: از فاضلاب رشت دوبار در ماه نمونه گيري شد. سوسپانسيون باكتري هاي شماره 1، 6، 46، 48 و 51 كلكسيون SARA A و دبل LB براث (Double LB) با فاضلاب فيلتر شده مخلوط شدند. پس از سانتريفيوژ و فيلتراسيون، رقت هاي سريالي تهيه و باكتريوفاژ جداسازي شد. ويژگي هاي مورفولوژيكي آنها توسط ميكروسكوپ الكتروني TEM تعيين گرديد. در نهايت دامنه ميزباني عليه 19 سويه انساني كلكسيون انجام شد تا طيف اثر باكتريوفاژها تعيين شود. يافته ها: تشكيل پلاك شفاف روي محيط LB آگار دو لايه نشان دهنده ليز سويه هاي تست شده توسط باكتريوفاژهاي جداسازي شده بود. نتايج دامنه ميزباني نشان داد كه بعضي از اين فاژها قادر به ليز تعدادي از ساير باكتري هاي كلكسيونSARA A بودند. عكس برداري توسطTEM نشان داد كه فاژهاي ايزوله شده عليه كلكسيون SARA A، متعلق به خانواده Siphoviridae وPodoviridae بودند. نتيجه گيري: اين مطالعه اولين گزارش جداسازي باكتريوفاژ عليه سويه هاي رفرنس سالمونلا در ايران است. سويه شماره 51 (سالمونلا پاراتايفي B) توسط باكتريوفاژ سالمونلا تايفي موريوم ليز شد كه بدين معنا مي باشد كه ممكن است سالمونلا تايفي كه يك پاتوژن حايز اهميت انساني است را بتواند ليز كند. كليد واژه ها: TEM، سويه استاندارد سالمونلا، باكتريوفاژ، مورفولوژي

ABSTRACT Background and Aim: Salmonella spp. is important in medicine. Most related infections are self-limited. Antibiotics are used for high risk patients such as children, old individuals and immune-compromised patients. Overuse of antibiotics has led to increased emergence of multi-drug resistant bacteria which are life-threatening. Phage therapy is an alternative method to reduce antibiotic use. Materials and Methods: Waste water samples were collected from sewage system of Rasht City twice a month. Prepared suspensions of Salmonella reference collection A (SARA) number 1, 6 (S. typhimurium) and 46, 48, 51 (S. paratyphi B) and double LB broth were mixed with filtrated waste water. After centrifugation and filtration, serial dilutions were prepared and phages were isolated. Morphologic characteristics were determined using TEM (Transmission electron microscopy). Finally, to assess the spectrum effect of the bacteriophages, we determined host range against 19 SARA strains. Results: Clear plaque formation on double layer LB agar indicated lysis of the test strains by isolated phages. The results of host range showed that some of the phages were able to lyse a number of other bacteria of SARA collection. Imaging with TEM indicated that the isolated phages against SARA collection belonged to Siphoviridae and Podoviridae families. Conclusion: This is the first report of phage isolation against Salmonella reference collection in Iran. SARA no. 51 (S. paratyphi B) was lysed by S. typhimurium phage. It means that the isolated phage may lyse S. typhi, which is an important human pathogen. Keywords: Salmonella reference collection, Bacteriophage, TEM, Morphology.