تعيين تنوع ژنتيكي و حساسيت جدايه‌هاي ترايكوفايتون منتاگروفايتيس در برابر اثرات ضدقارچي عصاره‌ي اتانولي بنسرخ

Determination of genetic diversity and susceptibility of Trichophyton mentagrophytes isolates against antifungal effects of ethanolic extract of Allium jesdianum

درماتوفيت ها يك گروه از قارچ‌ها با خواص كراتينوفيليك هستند. آن ها قادرند با توليد آنزيم هاي پروتيوليتيك مانند كراتيناز به اپيدرم به ويژه لايه ي شاخي تهاجم برند. ترايكوفايتون منتاگروفايتيس يك گونه درماتوفيتي شايع جهاني است. اين گونه بر اساس ويژگي‌هاي ژنتيكي‌ واريته هاي مختلفي دارد. در اين مطالعه تنوع ژنتيكي 20 جدايه‌ي باليني ترايكوفايتون منتاگروفايتيس و حساسيت آن ها به عصاره ي اتانولي گياه بنسرخ ارزيابي شدند. تنوع ژنتيكي جدايه ها با روش RAPD – PCR با استفاده از 4 پرايمر OPN16، A08، OPD18 و R28 سنجش شد. سپس، حساسيت جدايه‌هاي ترايكوفايتون منتاگروفايتيس به عصاره ي بنسرخ با روش استاندارد ميكرودايلوشن براث تعيين شد. مقادير MIC جدايه ها بين mg/ml 6.1 و mg/ml 49.3 بودند (ميانگين MIC: 20.3)، در حالي كه مقادير MFC جدايه ها بين mg/ml 24.6 و 49.3 بودند (MFC: mg/ml 40.6). ميانگين 28 قطعه DNA تكثير شده‌ در واكنش RAPD-PCR به دست آمدند. بيش ترين قطعات DNA تكثير شده (9 باند) مربوط به پرايمر OPD18 بودند. پرايمر R28 كم ترين قطعات DNA تكثير شده (5 باند) را نشان داد. دندروگرام ترسيم‌ شده 3 گروه اصلي را بين 20 جدايه ي ترايكوفايتون منتاگروفايتيس بر اساس تمام پرايمرها در فاصله ي ژنتيكي 65 درصد شناسايي كرد. اكثر جدايه هاي ترايكوفايتون منتاگروفايتيس (75 درصد) در گروه 2 قرار گرفتند و 100 درصد تشابه ژنتيكي فقط بين 2 جدايه مشاهده شد. نتيجه‌گيري شد كه تمام ژنوتيپ‌هاي ترايكوفايتون منتاگروفايتيس حساس به بنسرخ بودند. ارتباط بين حساسيت ضدقارچي و ژنوتيپ ترايكوفايتون منتاگروفايتيس ممكن است از اهميت بالقوه ي درماني برخوردار باشد و مطالعات گسترده‌تري براي اثبات اين يافته ضروري هستند.

Dermatophytes are a group of fungi with keratinophilic properties. They are able to invade epidermis, especially stratum corneum, by the production of proteolytic enzymes such as keratinase. Trichophyton mentagrophytes (T. mentagrophytes) is a common cosmopolitan dermatophyte species. This species has different varieties based on genetic characteristics. In this study genetic diversity of 20 clinical isolates of T. mentagrophytes and their susceptibility to ethanolic extract of Allium jesdianum (A. jesdianum) were evaluated. Genetic diversity of the isolates was assessed by Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) method using 4 primers including OPN16, A08, OPD18 and R28. Then, susceptibility of T. mentagrophytes isolates to A. jesdianum extract was determined by standard microdilution broth method. The MIC values of the isolates were between 6.1 and 49.3 mg/ml (mean MIC: 20.3 mg/ml), whereas the MFC values of the isolates were between 24.6 and 49.3 mg/ml (mean MFC: 40.6 mg/ml). Twenty eight propagated DNA fragments were achieved in RAPD-PCR reaction. The most propagated DNA fragments (9 bands) were related to the OPD18 primer. The R28 primer showed the least propagated DNA fragments (5 bands). Drawn dendrogram identified 3 main groups among 20 T. mentagrophytes isolates according to all primers in 65% genetic distance. Most of T. mentagrophytes isolates (75%) were placed in group 2 and 100% genetical similarity was only seen between 2 isolates. It was concluded that all T. mentagrophytes genotypes were susceptible to A. jesdianum. The correlation between antifungal susceptibility and T. mentagrophytes genotype may be of potential therapeutic significance and larger studies are needed to prove this finding.