بررسي شيوع سرمي توكسوپلاسموزيس در گوسفندان روستاهاي شهرستان تبريز با روش هاي ايمونوبلاتينگ

A survey on the seroprevalence of toxoplasmosis in sheep from rural areas of Tabriz by immunoblotting assays

توكسوپلاسموزيس يكي از بيماري هاي مشترك با انتشار جهاني است كه عامل آن تك ياخته ي توكسوپلاسما گوندي است. اين تك ياخته مي تواند انواع سلول ها را در انسان و تقريباً تمام حيوانات آلوده سازد. اين مطالعه با هدف تعيين شيوع سرمي توكسوپلاسموزيس در گوسفندان روستاهاي شهرستان تبريز و با به كارگيري آزمون هاي دات بلات و وسترن بلات بر اساس واكنش آنتي ژن محلول تاكي زوييت هاي توكسوپلاسما گوندي با آنتي بادي هاي موجود در نمونه هاي سرم گوسفندان، انجام گرفت. مجموعاً، 186 نمونه ي خون از گوسفندان (93 راس ميش، 93 راس قوچ) روستاهاي شهرستان تبريز در پاييز و زمستان سال 1392، اخذ شده و سرم آن ها جدا گرديد. نخست، سرم ها براي تعيين ميزان شيوع توكسوپلاسموزيس با آزمون دات بلات ارزيابي شدند. سپس، نمونه هاي سرمي مثبت براي تاييد نهايي آلودگي و مشاهده ي باندهاي اختصاصي 30 كيلو دالتون با آزمون وسترن بلات ارزيابي شدند. بر اساس آزمون دات بلات، شيوع سرمي در گوسفندان روستاهاي شهرستان تبريز 9.14 درصد بود. شيوع توكسوپلاسموزيس در بين گوسفندان ماده (11.83 درصد) بيش تر از گوسفندان نر (6.45 درصد) بود، ولي از نظر آماري اين تفاوت معني‌دار نبود (0.05 < p). در آزمون وسترن بلات روي تمامي نمونه هاي سرمي مثبت، باند 30 كيلو دالتون به طور آشكار مشاهده شد. در بررسي حاضر هيچ تفاوت آشكاري در نمونه هاي آلوده در مورد باندهاي آنتي ژني/ پروتييني مشاهده نشد و پروتيين هاي با وزن مولكولي 30 كيلودالتون و كوچك تر از 10 كيلو دالتون به عنوان پروتيين هاي ايمني زاي تاكي زوييت توكسوپلاسما گوندي سويه ي RH شناخته شدند.

Toxoplasmosis is a zoonotic disease with a worldwide distribution which is caused by Toxoplasma gondii. It infects various cells of human and approximately all animals. The current study was conducted to determine the seroprevalence of T. gondii in sheep from rural areas of Tabriz by Western blot and Dot blot assays in which T. gondii soluble antigen was reacted with antibodies raised in serum samples of sheep. From October 2012 to April 2013, a total of 186 blood samples were collected from sheep (93 ewes and 93 rams) rural areas of Tabriz. Initially, the sera were separated and evaluated to determine the seroprevalence of toxoplasmosis by Dot blot assay. Then, positive serum samples were evaluated by Western blot assay in order to final confirmation of infection and observation of 30 KDa specific bands. Based on Dot blot assay, the seroprevalence rate in the sheep from rural areas of Tabriz was 9.14%. The seroprevalence of toxoplasmosis was higher in ewes (11.83%) than that of rams (6.45%). However, this difference was not statistically significant (P > 0.05). The patterns of Western blot assay on all positive sera were manifested as distinct 30 KDa bands. In this study, no distinct difference was observed on the antigen/protein bands pertaining to infected samples and the proteins with 30 KDa molecular weight and those being smaller than 10 KDa were identified as the immunogenic proteins of T. gondii tachyzoites strain RH.