رديابي ژن toxA در سويه‌هاي سودوموناس آئروژينوزاي جداشده از محصولات لبني، با روش PCR و تعيين الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي

Detection of Tox A Gene in Pseudomonas aeruginosa Strains Isolated from Dairy Products Using PCR and Determining the Antibiotic Resistance Pattern

زمینه و هدف: شیر به‌علت ارزش غذایی بالا، در تغذیه انسان نقش به‌سزایی دارد و از طرفی، محیط مناسبی برای رشد باكتری‌هایی چون سودوموناس آئروژینوزا است. سودوموناس آئروژینوزا، پاتوژن فرصت‌طلبی است كه مقاومت بالایی نسبت به آنتی‌بیوتیك‌ها داشته و می‌تواند در بیماران دچار نقص سیستم ایمنی، ایجاد بیماری ‌كند. این تحقیق با هدف جداسازی سودوموناس آئروژینوزا از شیرخام، ردیابی ژن toxA در جدایه‌ها با روش PCR و تعیین مقاومت آنتی‌بیوتیكی، مقاومت چندگانه جدایه‌ها و تشخیص ایزوله‌های ESBL انجام گرفت. روش بررسی: در این مطالعه مقطعی، تعداد 360 نمونه (300 نمونه شیرخام، 30 نمونه شیر پاستوریزه و 30 نمونه خامه) از دامداری‌ها و فروشگاه‌های شهر قم جمع‌آوری شد. ابتدا با روش‌های استاندارد میكروب‌‌شناسی، جدایه‌های سودوموناس آئروژینوزا تأیید شدند، سپس حضور ژن اگزوتوكسین A با روش PCR در تمامی جدایه‌ها، و مقاومت آنتی‌بیوتیكی جدایه‌ها در مقابل 10 آنتی‌بیوتیك منتخب از رده‌های مختلف آنتی‌بیوتیكی طبق استاندارد CLSI بررسی گردید. داده‌ها با استفاده از آزمون تست تی تجزیه و تحلیل شدند. یافته‌ها: از 360 نمونه مورد بررسی، 117 سودوموناس آئروژینوزا جدا شد كه از این تعداد، 101 سویه (30/86%) دارای ژن toxA بود. در بررسی مقاومت آنتی‌بیوتیكی، بیشترین مقاومت نسبت به آنتی‌بیوتیك سفتازیدیم به دست آمد و مشخص گردید بین حضور ژن toxA و مقاومت نسبت به آنتی‌بیوتیك‌ها در جدایه‌های سودوموناس آئروژینوزا، ارتباط معنی‌داری وجود دارد. نتیجه‌گیری: با توجه به شیوع بالای سودوموناس آئروژینوزا در شیرخام و وجود ژن‌‌های مقاومت به آنتی‌بیوتیك در باكتری، اعمال راهكارهای مناسب جهت كنترل بهداشت در دامداری‌ها، برای جلوگیری از انتشار باكتری ضروری است.

Background and Objectives: Due to the high nutritional value of milk, it has an important role in human nutrition, and on the other hand, it is a suitable medium for the growth of bacteria, such as Pseudomonas aeruginosa. Pseudomonas aeruginosa, is an opportunistic pathogen highly resistant to antibiotics and can cause disease in immunodeficient patients. The purpose of this study was isolation of Pseudomonas aeruginosa from raw milk, detection of tox A gene by PCR, and determining antibiotic resistance, multiple resistance of the isolates, and Identification of ESBL isolates.   Methods: In this cross-sectional study, a total of 360 samples (300 samples of raw milk, 30 samples pasteurized milk, and 30 samples of cream), were collected from animal husbandries and stores in Qom city. Initially, the isolates of Pseudomonas aeruginosa, were confirmed by standard microbiological methods, and then the existence of exotoxin A gene in all isolates was detected by PCR method and the antibiotic resistance of the isolates against 10 antibiotics selected from different antibiotic categories, was investigated according to the CLSI standard. The data were analyzed using t-test.   Results: Out of 360 studied samples, 117 Pseudomonas aeruginosa were isolated, among which 101 strains (86.30%) had tox A gene. In antibiotic resistance testing, the highest resistance was seen against ceftazidime, and it was revealed that there is a significant relationship between the presence of tox A gene and antibiotic resistance in the isolates of Pseudomonas aeruginosa.   Conclusion: Due to high presence of Pseudomonas aeruginosa in raw milk and existence of antibiotic resistance genes in this bacterium, applying appropriate strategies for hygiene control in animal husbandries, is necessary to prevent the spread of bacteria.