چندشكلي ژن تيروزيناز در ماهيان قزل آلاي رنگين كمان طلايي پرورشي (Golden Rainbow Trout: Oncorhynchus mykiss)

Polymorphism investigation of Tyrosinase gene in Golden Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)

به منظور بررسي چندشكلي ژن تيروزيناز در ماهيان قزل آلاي رنگين كمان طلايي، استحراج DNA از باله دمي 100 قطعه بچه ماهي انجام گرفتت. تكثير ناحيه پلي مورفيك bp423 ژن تيروزيناز با استفاده از تكنيك PCR و پرايمر هاي اختصاصي Tyr1.2r و Tyr1.2f انجام شد. سپس به منظور هضم آنزيمي از آنزيم برشگر Hinf1 استفاده شد. بر اين اساس سه الگوي برشي مشاهده شدند كه در حالت اول افراد داراي دو قطعه bp222 و bp201، داراي ژنوتيپ هموزيگوت NN بودند كه عمل هضم آنزيمي روي آن انجام گرفته بود. از بين 100 نمونه 26 نمونه داراي اين ژنوتيپ بودند. افراد داراي bp423 داراي ژنوتيپ هموزيگوت MM بوده كه مورد هضم قرار نگرفت و تعداد 36 نمونه را شامل شد. در ژنوتيپ MN هر سه اندازه bp423، bp201 و bp222 مشاهده شد كه بيان گر ژنوتيپ هتروزيگوت بود و از كل 100 نمونه 38 مورد داراي اين ژنوتيپ بودند. تعداد آلل N و M به ترتيب 90 و 110 و مقدار فراواني ژني براي آلل N و M به ترتيب 45/0 و 55/0 حاصل شد. تعداد فراواني ژنوتيپي NN، MN و MM به ترتيب 26/0، 38/0و 36/0 به دست آمد. نتايج حاصل از كاي اسكور و جي اسكور خروج جمعيت از تعادل هاردي-واينبرگ را نشان داد كه علت خروج جمعيت قزل آلاي رنگين كمان از تعادل، احتمالاً تكثير مصنوعي مي باشد.

In order to identify polymorphisms in the Tyrosinase gene for Golden rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)، a total of 100 different samples (fry) were prepared and DNA extraction was performed from their caudal fins. The polymerase chain reaction (PCR) was amplified fragment of 423bp the Tyrosinase gene. The amplified fragments were using specific primers (Tyr1.2r and Tyr1.2f) and Hinf1 cutting enzyme. In enzymatic digestion of the PCR products was observed three restricted patterns in 222bp and 201bp with NN (26 samples)، and 423bp with MM (36 samples). The number of alleles N and M were 90 and 110 respectively، the gene frequency for allele N and M were .45 and .55 respectively. The number of genotypic frequencies NN، MN and MM were .26، .38 and .36 respectively. The results showed that deviations from Hardy -Weinberg equilibrium were in all cases، due to artificial reproduction، probably.