بررسي اثر ضدباكتري عصاره هاي برگ جعفري كوهي انبوه عليه استافيلوكوكوس اورئوس و اشرشياكلي و تفكيك جزءهاي موثر

Investigation of Antibacterial Activity of Pimpinella affinis Leaves Against E. coli and S. aureus and Separation of Active Fractions

مقدمه: جعفري كوهي انبوه (Pimpinella affinis) از خانواده چتريان و يكي از سبزي هاي مصرفي مناطق شمالي ايران است. هدف: پژوهش حاضر به منظور بررسي اثر ضدباكتري عصاره هاي برگ جعفري كوهي انبوه عليه دو سويه استافيلوكوكوس اورئوس و اشرشيا كلي و جداسازي اجزاي موثرآن انجام شد. روش بررسي: حداقل غلظت بازداري (MIC) عصاره هاي هگزاني، اتيل استاتي و متانولي به دست آمده از برگ جعفري كوهي انبوه عليه استافيلوكوكوس اورئوس و اشرشياكلي (تهيه شده از سازمان پژوهش هاي علمي و صنعتي ايران) به روش براث ميكرودايلوشن بررسي شد. با توجه به نتايج حاصل، عصاره اتيل استاتي جهت جداسازي اجزاي فعال آن انتخاب و سپس با استفاده از روش هاي كروماتوگرافي ستوني و لايه نازك (TLC) به 29 جزء تفكيك شد. اثر ضد باكتريايي اجزاي به دست آمده نيز مورد بررسي قرار گرفت. نتايج: عصاره اتيل استاتي (با mg/ml 1/0=MIC عليه استافيلوكوكوس اورئوس و mg/ml 2/0=MIC عليه اشرشياكلي) نسبت به دو عصاره ديگر نتايج بهتري را نشان داد. از ميان 29 جزء به دست آمده از عصاره اتيل استاتي، جزءهاي 5F-3F، 8F و 9F عليه استافيلوكوكوس اورئوس (MIC=5.0μg/ml، P<0.05) داراي بالاترين قدرت مهاركنندگي بودند. حداقل غلظت بازداري كلرامفنيكل به عنوان استاندارد عليه استافيلوكوكوس اورئوس برابر با(MIC=1.0μg/ml، P<0.01) مي باشد. تمامي نتايج گزارش شده داراي p-value كمتر از 0/05 مي باشند و داراي سطح معني داري مناسبي هستند. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه اثر مهاركنندگي هر سه عصاره هگزاني، اتيل استاتي و متانولي بر روي باكتري استافيلوكوكوس اورئوس بيشتر از اشرشيا كلي است. همچنين جزء بندي عصاره اتيل استاتي منجر به بدست آوردن جزءهايي (5F-3F، 8F و 9F) تا 200 برابر فعال تر از خود عصاره اتيل استاتي شد.

Background: Pimpinella affinis (Apiaceae family) is a vegetable in the north of Iran. Objective: This study was conducted to investigate antibacterial activity of Pimpinella affinis (against E. coli and S. aureus) and separate its active fractions. Methods: Antibacterial activities of n-hexane، ethyl acetate and methanol extracts of leaves of P. affinis (against E. coli and S. aureus) were measured using broth microdilution method in MIC. Subsequently، the ethyl acetate extract was separated in to 29 fractions using column chromatography and thin layer chromatography (TLC). Also، antibacterial activities of the fractions have been measured. Results: According to the results، among the extracts، ethyl acetate extract showed the best activities against E. coli and S. aureus (MICs=1.0 and 2.0 mg/ml، respectively). Also، among the obtained fractions from ethyl acetate extract، F3-F5، F8 and F9 showed best inhibitory activities (MIC=5.0μg/ml، P<0.05) compared with that of the chloramphenicol (MIC=1.0μg/ml، P<0.01). All of the results have p-values less than 0.05. Conclusion: The results showed that the Gram positive S. aureus is more sensitive to the extracts than the Gram negative E. coli. Also، partitioning of the ethyl acetate extract leaded to obtain antibacterial fractions (F3-F5، F8 and F9) with 200-fold more active than the ethyl acetate extract.