بررسي تنوع ژنتيكي Lolium multiflorum با استفاده از نشانگر ملكولي ISSR و صفات كاريوتيپي

The study of genetic variation in Lolium multiflorum using ISSR molecular marker and karyotype traits

تنوع ژنتيكي تعداد 13 ژنوتيپ از گونه Lolium multiflorum بر اساس خصوصيات كاريوتيپي و ملكولي مورد بررسي قرار گرفت. براي هر ژنوتيپ، كاريوتيپ براي پنج سلول متافازي تهيه شد. ژنوتيپ هاي مورد بررسي داراي كاريوتيپ تقريباً نامتقارني بودند و در بين آن ها تنوع معني دار براي صفات كاريوتيپي وجود داشت. نتايج مقايسه ميانگين ها نشان داد ژنوتيپ هاي ديپلوئيد متوسط طول كروموزوم بيش-تري نسبت به ژنوتيپ هاي تتراپلوئيد داشتند. ژنوتيپ هاي تتراپلوئيد عدم تقارن درون كروموزومي بيش تري نسبت به ژنوتيپ هاي ديپلوئيد داشتند. تكامل كاريوتيپي گونه L. multiflorum با توجه به ژنوتيپ هاي مورد بررسي بيش تر از طريق عدم تقارن درون كروموزومي بود و با افزايش سطح پلوئيدي از ديپلوئيد به تتراپلوئيد عدم تقارن درون كروموزوم ها بيش تر شد. ژنوتيپ هاي 390، 374، vi و plc بيش ترين تكامل كاريوتيپي و ژنوتيپ هاي 1624 و 1765 كم ترين تكامل كاريوتيپي را داشتند. تنوع ژنتيكي ژنوتيپ هاي مورد مطالعه با استفاده از 12 آغازگر ISSR مورد بررسي قرار گرفت كه از اين 12 آغازگر 9 عدد داراي باندهاي قابل امتياز دهي بودند. آغازگرهاي ISSR در مجموع توانستند 66 باند توليد كنند كه از اين تعداد، 10 باند يك شكل مشاهده شد و ساير باندها چند شكل بودند. آغازگر هاي IS9 و IS12 بيش ترين تعداد باند (تعداد 10 باند) و آغازگر IS15 كم ترين تعداد باند (تعداد سه باند) را نشان دادند. بر اساس ماركر ISSR چندشكلي مطلوبي در بين ژنوتيپ ها مشاهده شد و آغازگرهاي IS9، IS10، IS13، IS14 و IS16 به عنوان آغازگرهاي مناسب براي بررسي هاي گونه چچم يك ساله، تعيين شدند. بر اساس آغازگر هاي مورد بررسي، ژنوتيپ هاي ديپلوئيد و تتراپلوئيد به صورت كامل تفكيك نشدند و دو ژنوتيپ ديپلوئيد 393 و «374 با ژنوتيپ هاي تتراپلوئيد در يك گروه قرار گرفتند. لازم به ذكر است گروه بندي ژنوتيپ ها با منشا جغرافيايي آن ها تطابق نداشت.

The genetic variation was studied for 13 genotypes of Lolium multiflorum using molecular and cytogenetical markers. karyotype were prepared for 5 metaphases cells in each genotype. The studying genotypes had an asymmetry karyotype and variation was significant between genotypes for karyotypic characters. The results of compare means showed that the diploid genotypes had an average chromosome length more than tetraploid genotypes. The tetraploid genotypes had the intrachromosomal asymmetry more than diploid genotypes. Karyotypic evolution for L. multiflorum was more from intrachromosomal asymmetry، considering studied genotypes and intrachromosomal asymmetry increased by development of ploidy level. The genotypes of 390، 374، vi and plc had the most karyotypic evolution and the genotypes of 1624 and 1765 had the lowest karyotypic evolution. Genetic variations for studying genotypes were surveyed using 12 ISSR primers، that the number of nine primers can be scored. The ISSR primers can be produced the number of 66 bands، which the polymorphisms were showed for the number of 56 bands. The primers of IS9 and IS12 showed the highest number of band (10 bands) and IS15 showed the lowest number of band (3 bands). A desirable polymorphism between genotype observed based on ISSR markers، which the primers of IS9، IS10، IS13، IS14 and IS16 were determined for genetic variation study in Lolium multiflorum as desirable primers. The tetraploid and diploid genotypes separated based on surveyed primers. The diploid genotypes of 393 and 374" merely were grouping with tetraploid genotypes. Grouping of genotypes based on markers don’t agreement with geographical origin of genotypes.