تأثير ديكلوفناك بر فعاليت كاسپاز-8 و 9 سلول‌هاي سرطاني دهانه رحم در محيط كشت سلولي

The Effect of Diclofenac on Caspase-8 and Caspase-9 Activity in Cervical Cancer Cells (HeLa) in Cell Culture

زمینه و هدف: مطالعات نشان می‌دهند داروها بر تكثیر سلول‌های سرطانی تأثیرگذارند. در این مطالعه تأثیر دیكلوفناك بر فعالیت كاسپاز - 8 و 9 در سلول‌های سرطانی دهانه رحم (HeLa) در محیط كشت سلولی بررسی گردید. روش بررسی: در این مطالعه تجربی - آزمایشگاهی، سلول‌های HeLa از بانك سلولی ایران (انستیتو پاستور تهران، ایران) خریداری شدند، سپس در محیط DMEM غنی‌شده با 10% FBS كشت داده شده و در پلیت 6 خانه‌ای در انكوباتور به مدت 24 ساعت نگهداری شدند. در ادامه، سلول‌ها در مواجهه با غلظت‌های مختلف دیكلوفناك قرار گرفتند و میزان زنده‌مانی سلول‌ها با تست MTT بررسی و دوز IC50 محاسبه گردید. فعالیت كاسپاز-8 و 9 بر روی سلول‌های HeLa به روشELISA  ارزیابی شد. داده‌ها با استفاده از روش آنالیز واریانس یك‌طرفه،               كلموگروف- اسمیرنوف و آزمون تست‌ توكی تحلیل شدند. یافته‌ها: دوزهای 1/0، 1 و 10 میلی‌گرم برمیلی‌لیتر از دیكلوفناك (به ترتیب با 05/0p<، 001/0p<، 001/0p<) در مقایسه با گروه كنترل سبب كاهش زنده‌مانی سلول‌های HeLa گردید. درصد فعالیت كاسپاز-9 نسبت به گروه كنترل، افزایش معنی‌داری داشت (05/0p<). درمقابل، درصد فعالیت كاسپاز-8 نسبت به گروه كنترل، تفاوت معنی‌داری نداشت (05/0

Background and Objectives: Studies have shown that drugs can affect on proliferation of cancer cells. The main aim of this study was to determine the effects of diclofenac on caspase-8 and caspase-9 activity in cervical cancer cells (HeLa) in cell culture.   Methods: In this experimental-laboratory study, HeLa cancer cells were purchased from Iran Cell Bank (Pasteur Institute, Tehran, Iran). HeLa cancer cells were cultured in DMEM culture media enriched with 10% FBS, stored in 6 well plate, and incubated for 24 hour. Then, cells were exposed to different concentrations of diclofenac and the viability of cells was evaluated by MTT assay, and the IC50 dose was calculated. The activity of Caspase-8 and caspase-9 on heLa cells, was assayed by ELISA method. The data were analyzed using one-way analysis of variance, Kolmogorov-Smirnov, and Tukey tests.   Results: Findings showed that 0.1, 1, and 10mg/ml doses of diclofenac decrease the viability of HeLa cancer cells compared to the control group (p<0.05, p<0.001, and p<0.001, respectively). The percentage of caspase-9 activity was significantly higher than the control group (p<0.05). The caspase-8 activity had no significant change compared to the control group (p>0.05).   Conclusion: The results of this study revealed that diclofenac has cytotoxic effects on HeLa cancer cells. Although ths effect is different based on the dose used.