تاثير زهر زنبور عسل بر بيان ژن VEGF A بر سلول‌هاي سرطان پروميلوسيتي (HL-60)

Effect of Bee venom on VEGF-A expression in HL-60 cell line

مطالعات مختلف بر اثرات ضد سرطاني زهر زنبور عسل تاكيد دارد. آنژيوژنزيا تشكيل رگ هاي خوني جديدكه براي تكوين جنين و بسياري از وقايع فيزيولوژيكي مورد نياز است دربسياري ازشرايط پاتولوژيك نظير رشد تومورها نيز ضروري است. يكي از ژن هاي فعال در روند رگ زايي VEGF-A مي باشد. در اين پژوهش تاثير زهر زنبور عسل بر بيان اين ژن بررسي گرديد. سلول هاي HL-60 در محيط كشت RPMI1640غني شده با 10% FBS كشت داده شد. پس از 24 ساعت، سلول ها توسط زهر زنبور در غلظت هاي 2، 4، 8و10 ميكروگرم بر ميلي ليتر تيمار گرديدند. 48 ساعت پس از تيمار، RNA تام استخراج و cDNA با استفاده از توالي ژن مورد نظر سنتز شد و محصولات سنتزشده توسط Real Time PCR جهت بررسي سطح بيان ژن VEGF-Aمورد ارزيابي قرار گرفت.نتايج بررسي آماري داده ها نشان داد كه كاهش معنادار (0/05 < P)در ميزان بيان ژنVEGF-A تيمارشده با غلظت هاي 2، 4، 8 و10ميكروگرم بر ميلي ليتر زهر زنبور عسل نسبت به سلول هاي گروه كنترل ديده مي شود به نحوي كه بيشترين تغييرات كاهشي بيان ژن مربوط به غلظتµg/ml 10زهر زنبور بود.نتايج بيانگر كاهش بيان ژن VEGF-A، بيوماركر ويژه آنژيوژنز در نمونه هاي تحت تيمار با زهر زنبور عسل در مقايسه با گروه كنترل است.

Research indicates that bee venom has potent anti-inflammatory, anti-tumor and anticancer. Angiogenesis or new blood vessel formation, which is required for embryonic development and many physiological events, plays a crucial role in many pathological conditions such as tumor growth. One of the main genes which is involved in the process of angiogenesis is VEGF-A. In this in vitro study, the effects of Bee venom extract on VEGF-A expression were examined. In this experimental study, HL-60 cells were grown in RPMI 1640 medium supplemented with 10% Fetal Bovine Serum (FBS) and incubated at 37˚C with 5% CO2. After 24 h of cell culture, they were treated by the Bee venom at concentrations of 2, 4, 8 and 10 µg/ml. 48 hours after treatment, total RNA was extracted and cDNA was synthesized using the sequence of target gene. Finally, the synthesized products were analysed by Real Time PCR to determine the expression level of VEGF-A. The results of data analysis showed the inhibitory effect of Bee venom in concentrations of 2, 4, 8 and 10 µg/ml on VEGF-A expression in HL-60 cells in comparison with control group, indicating the highest reduction of gen expression for the highest concentration of Bee venom (10 µg/ml). Results indicated a decrease in the expression of VEGF-A, specific biomarker of angiogenesis, in the treated samples compared to the control group.