تنوع ژنتيكي سيب شرقي (Malus Orientalis Uglitz.) جنگل هيركاني ايران با استفاده از نشانگر ISSR-PCR

Genetic Diversity of Malus orientalis in Hyrcanian Forest Using ISSR-PCR Markers

سيب شرقي (Malus orientalis) داراي پراكنش وسيع در سرتاسر جنگل هيركاني از مناطق پايين بند تا نواحي كوهستاني و شيب دار مي باشد. به منظور بررسي تنوع ژنتيكي، نمونه هاي برگ 104 پايه از چهارده رويشگاه جنگل هاي هيركاني جمع آوري شدند. پس از استخراج DNAي ژنومي، چند شكلي DNAي هاي تكثير شده با استفاده از 4 آغازگر 8YC(GA)، 8YA(AC)، (AG)8AT و (AC)8G به روش ISSR-PCR بررسي گرديد. اين مطالعه نشان داد كل آلل هاي تكثير شده براي 4 آغازگر، برابر 385 آلل با ميانگين هتروزيگوسيتي 0/049 است. بطوريكه بيشترين ميزان هتروزيگوسيتي در جمعيت كدير و لمزر (0/059) و كمترين ميزان آن نيز مربوط به جمعيت افراتخته (0/031) در شرق استان گلستان است. بر اساس شاخص شباهت ژنتيكي Nei بيشترين فاصله ژنتيكي مربوط به جمعيت هاي سياه بيل و ماسال و كمترين آن مربوط به جمعيت هاي يوش، افراتخته و دينكوه از يكديگر بود. آناليز واريانس مولكولي تنوع درون جمعيت ها و بين جمعيتي، را به ترتيب 94% و 6% از كل تنوع را نشان داد، كه بيانگر تنوع درون جمعيتي قابل ملاحظه در جمعيت هاي اين گونه است. اين تحقيق نشان داد عليرغم شرايط رويشگاهي متفاوت و فاصله جغرافيايي زياد جمعيت ها از يكديگر، سطح تمايز ژنتيكي بين جمعيت هاي مورد مطالعه (به استثناي جمعيت جلگه اي سياه بيل) پايين و هتروزيگوسيتي درون جمعيت ها بسيار مشابه با يكديگر است. اين مسئله مي تواند حاكي از سطح بالاي برقراري جريان ژن و تبادل ژنتيكي بين جمعيت هاي سيب جنگلي شمال ايران باشد.

Apple (Malus orientalis.) distributed throughout the Hyrcanian forest from lowland regions to steep and mountainous areas. For evaluation genetic diversity, leaf material were collected from 104 individual of were 14 population. DNA was extracted and DNA polymorphism were considered using four primers (GA)8YC, (AC)8YA,(AG)8AT and (AC)8G with ISSR-PCR method. The results showed that for four primers was detected 385 allele with 0.049 heterozygosiyt.The mean heterozygosity was 0.049 and varied from 0.031 in “Afratakhte” population to 0.059 in “kodir” and “Lamzer” populations. The maximum Nei genetic distance was belong to “Siahbill” and “Masal” populations and the minimum was related to “Yoush”, “Afratakhte” and “Dinekooh”. the AMOVA result indicated that the intra and inter population diversity were 94% and 6%, respectively that indicate significant within population diversity of this species.Despite the different habitat conditions and long geographical distance among populations, The low genetic differentiation (excluding Siahbill population) and similar heterozygosity within populations suggest high gene flow among populations of Malus orientalis in north of Iran.