اصلاح زيستي خاك هاي آلوده به n-هگزادكان با استفاده از باكتري هاي پسودوموناس آئروژينوزا جداسازي شده از نواحي آلوده ساحلي

Bioremediation of n-Hexadecane Contaminated Soils Using Pseudomonas aeruginosa Bacteria Isolated from Coastal Areas

سابقه و هدف: آلودگي خاك هاي مناطق نفت خيز جنوب كشور و مجاور خطوط انتقال نفت و گاز به انواع هيدروكربن هاي نفتي به يك معضل عمده زيست محيطي تبديل شده است. هدف از پژوهش فعلي، تعيين بازده حذف زيستي n- هگزادكان از خاك به عنوان آلاينده مدل با استفاده از فرايند اصلاح زيستي بود. مواد و روش ها: خاك هاي داراي آلودگي قديمي به هيدروكربن ها نفتي به عنوان منبع جداسازي باكتري ها مورد استفاده قرار گرفت. جداسازي باكتري هاي تجزيه كننده n- هگزادكان با غني سازي در محيط كشت نمكي و گرماگذاري در دماي 31 درجه سانتي گراد بر روي يك شيكر انكوباتور با دور rpm 150 با انجام كشت هاي مكرر يك هفته اي طي6 هفته انجام شد. در نهايت دو سويه خالص جداسازي و به وسيله PCR شناسايي شدند. بازده حذف زيستي غلظت هاي اوليه n- هگزادكان 500، 1000 و mg/kg 5000 طي 8 هفته مطالعه شد. يافته ها: دو سويه باكتري پسودوموناس آئروژينوزا با قابليت تجزيه n- هگزادكان جداسازي شدند. بازده حذف حذف n-هگزادكان در انتهاي روز 56 به ازاي غلظت هاي اوليه 500، 1000 و mg/kg 5000 به ترتيب 93/6 درصد،87/5 درصد و 69/62 درصد بود. استنتاج: باكتري هاي پسودوموناس آئروژينوزا جداسازي شده نشان دهنده قابليت بالاي تجزيه زيستي n-هگزادكان در خاك و نيز پتانسيل توليد بيوسورفكتات بوده و مي توان آن ها را براي اصلاح زيستي خاك هاي آلوده به هيدروكربن هاي نفتي به كار برد.

Background and purpose: Soil pollution to hydrocarbons in oil field zones in southern Iran and areas close to oil and gas transportation pipe lines is a major environmental problem. The current study aimed at determining the efficiency of bioremediation of n-Hexadecane contaminated soil as a model contaminant. Materials and methods: Aged hydrocarbon contaminated soils were used as the origin of bacteria isolation. Isolation of n-Hexadecane degrading bacteria was carried out through enrichment in mineral salt medium and incubation in 31 oC in shaker incubator at 150 rpm by repetitive cultures during 6 consecutive refreshing. Finally, two pure strains were isolated and identified by PCR. Bioremediation of initial n-Hexadecane concentrations of 500, 1000 and 5000 mg/kg was investigated in eight weeks. Results: Two Pseudomonas aeruginosa strains capable of n-Hexadecane biodegradation were isolated. The removal efficiencies at the end of day 56 for n-Hexadecane initial concentrations of 500, 1000 and 5000 mg/kg were 93.6%, 87.5%, and 69.62%, respectively. Conclusion: Isolated Pseudomonas aeruginosa bacteria demonstrated high n-Hexadecane biodegradation potential in soil and also biosurfactant production, therefore, they could be used for bioremediation of hydrocarbon contaminated soils.