ارزيابي تكنيك هاي ICT،ELISA و Real Time PCR در تشخيص هپاتيت B در بيماران دياليزي،تالاسمي و هموفيلي

Evaluation of ICT, ELISA and Real Time PCR in Detection of Hepatitis B in Hemodialysis, Thalassemia and Hemophilic Patients

سابقه و هدف: امروزه استفاده از تكنيك هاي اليزا (ELISA(Enzyme-linked Immunosorbant Assay و تست سريع ايمونوكروماتوگرافيك ICT(Immunochromatographic) Test جهت تشخيص و غربالگري سريع هپاتيت B سبب كاهش خطر انتقال اين بيماري شده است. با اين وجود در بيماران پرخطر نظير همودياليز، تالاسمي و هموفيلي به دليل دريافت مقادير زيادي خون ميزان خطرابتلا هپاتيت B هنوز بالا مي باشد. هم چنين به دليل ابتلا به نوع جهش يافته اين ويروس و ايجاد نتايج منفي كاذب در اين بيماران استفاده از تست هاي ملكولي مانندواكنش زنجيره پلي مراز (PCR(polymerase chain reaction جهت تشخيص اين بيماري ضروري مي باشد. هدف از اين مطالعه مقايسه كارايي روش هاي سريع الايزا و ICT با تكنيك استاندارد طلايي Real Time PCR درتشخيص هپاتيت B در بيماران پرخطر بوده است. مواد و روش ها: در اين مطالعه مقطعي 100 بيمارهمودياليز،تالاسمي و هموفيلي به ترتيب با روش Real Time PCR به عنوان استاندارد طلايي براي تشخيصDNA HBV و از نظر HBSAg به روش ELISA با كيت هاي الايزاي نسل چهارم و با روش سريعICT با كيت Ecotest® بررسي شدند. يافته ها: حساسيت (Sensitivity)و اختصاصيت(Specificity) كيت هاي اليزاي نسل چهارم و كيتEcotest® در مقايسه با روش Real Time PCR 100 درصد همچنين ارزش اخباري مثبت (PPV) و منفي(NPV) آن ها نيز 100درصد بود. استنتاج: پيشرفت هاي اخير در توليد آنتي بادي منوكلونال ضدانواع جهش يافته ويروس هپاتيت B و بكارگيري آن ها در الايزاي نسل چهارم و تست هاي سريع ICT سبب افزايش چشم گير حساسيت و اختصاصيت تكنيك هاي فوق گرديد. بنابراين در موارد اورژانسي يا عدم وجود امكانات PCR real-time ، استفاده از روش هاي تشخيص سريع هپاتيت B را با اطمينان بيش تري مي توان پيشنهاد كرد.

Background and purpose: Recently, use of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and rapid Immunochromatographic test (ICT) in diagnosis and screening of patients with hepatitis B reduced the risk of hepatitis during blood transfusion. However, the incidence of hepatitis B is very high in highrisk patients such as hemodialysis, thalassemia and hemophilia which receive a lot of blood transfusions. Also, due to the infection with mutant type of hepatitis B virus (HBV) and false negative results, using molecular tests such as polymerase chain reaction (PCR) are necessary for detection of HBV. In this study we aimed to compare the efficacy of ELISA and rapid ICT kits with gold standard real time PCR for the detection of HBV in high risk patients. Materials and methods: In a cross-sectional study, 100 patients consisting of hemodialysis, thalassemia and hemophilia were assessed by real time PCR as the gold standard for detection of HBV DNA, fourth-generation ELISA kits including Dia-pro®, Pishtazteb®, Pasteur® and ICT Ecotest® were applied for detection of HBSAg. Results: Compared with real time PCR, sensitivity and specificity of fourth generation ELISA kits was 100% and positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) were 100%. Conclusion: Recent improvements in the monoclonal antibody production against mutant hepatitis B virus and their application in fourth-generation ELISA and rapid ICT kits resulted in significant increase in sensitivity and specificity of these methods. Thus, in emergency cases or lack of real-time PCR instruments, rapid ICT and ELISA kits could be suggest for detection of HBsAg.