آناليز پلي مورفيسم ژن CTLA-4 به عنوان ماركر توسعه مهاركننده ها در بيماران ايراني مبتلا به هموفيلي نوع A

Polymorphism analysis of the CTLA-4 (rs231775) gene as a marker of inhibitor development in Iranian patients with hemophilia A

سابقه و هدف: بروز مهاركننده عليه فاكتور انعقادي VIII اصلي ترين مشكل درمان بيماران مبتلا به هموفيلي A است. اخيرا ارتباط پلي مورفيسم هاي برخي از ژن هاي دخيل در سيستم ايمني با توسعه مهاركننده ها مشخص شده است. گزارش ها نشان داده اند كه آنتي ژن 4 وابسته به لنفوسيت T سيتوتوكسيك (CTLA-4) نقش مهمي در تنظيم فعاليت سلولT برعهده داشته و بنابراين پلي مورفيسم ژن CTLA-4 با استعداد ژنتيكي به بيماري هاي گوناگون خودايمني مرتبط مي شود. در اين مطالعه براي اولين بار ارتباط بين پلي مورفيسم ژن CTLA-4 و توسعه مهاركننده در بيماران هموفيل نوع A ايراني صورت گرفته است. مواد و روش ها: در اين مطالعه مورد-شاهديDNA ژنومي از نمونه هاي خون 55 بيمار هموفيلي A داراي مهاركننده و 45 بيمار هموفيلي A بدون مهاركننده استخراج شد. سپس، تعيين ژنوتيپ ژن CTLA-4 با استفاده از روش Tetra Primer ARMS PCR انجام شد. به علاوه، پلي مورفيسم هاي تك نوكلئوتيدي ژن CTLA-4 با استفاده از روش توالي يابي DNA مورد ارزيابي قرار گرفتند. از طرف ديگر، نقش فاكتور محيطي ابتلا به عفونت HCV در بيماران هموفيل داراي مهاركننده و بدون آن تعيين شد. نتايج: يافته هاي مطالعه نشان داد كه هيچ گونه ارتباط معني داري بين بروز مهاركننده ها با آلل ها و ژنوتيپ هاي مختلف ژن CTLA-4 وجود ندارد (0/05>P). به علاوه، تفاوت معني داري بين ابتلا به عفونت HCV و توسعه مهاركننده ها مشاهده شد (0/05

Background: Development of factor VIII (FVIII) inhibitor is the main problem of replacement therapy in patients with hemophilia A. Recently, the correlation of polymorphisms of some genes involved in immune system has been determined with inhibitor development. The reports showed that cytotoxic T lymphocyte antigen-4 (CTLA-4) plays an important role in regulating T cell activation and thus, CTLA-4 gene polymorphism is related to genetic susceptibility to various autoimmune diseases. This study aimed at investigating the correlation between polymorphism of CTLA-4 gene and inhibitor development in Iranian hemophilia A patients for the first time. Materials and Methods: In this case-control study, the genomic DNA was extracted from blood samples of 55 inhibitor positive and 45 inhibitor negative hemophilia A patients. Then, the genotyping of the CTLA-4 gene was performed using the Tetra Primer ARMS PCR. Moreover, the validation of single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the CTLA-4 gene was determined by DNA sequencing. On the other hand, the role of HCV infection was determined in inhibitor-positive and inhibitor-negative HA patients. Results: Results showed that no statistically significant difference was observed between the genotypic and allelic frequencies with the presence of inhibitors (P>0.05). Moreover, a significant correlation was observed between HCV infections and development of inhibitors (P<0.05). Conclusion: The CTLA-4 gene polymorphism does not play a role for inhibiting coagulation factor in Iranian patients with hemophilia type A.