تاثير استفاده از عسل طبيعي به عنوان ماده ي سرمامحافظ جديد بر نرخ زنده ماني، خروج از زونا و لانه گزيني در بلاستوسيست هاي منجمد-ذوب شده ي موش

The Effect of Using Natural Honey as New Cryoprotectant on Vitrified-warmed Blastocysts Survival, Hatching and Implantation Rate

بهينه سازي فرايند انجماد شيشه اي، به عنوان راهكاري جهت ذخيره ي رويان هاي حاصل از تكنيك هاي كمك باروري، مستلزم تقابل با عوامل مخربي از قبيل تشكيل كريستال هاي يخ، سميت سلولي و شوك اسمزي است كه رويان را در معرض شرايط نا مساعد قرار مي دهند. حضور كربوهيدرات ها به عنوان مواد سرما محافظ نفوذ نا پذير، تلاشي در راستاي كاهش اين تنش ها مي باشد. از آن جايي كه استفاده ي تركيبي از قندها نتايج بهتري را در پي داشته، در اين طرح، از عسل طبيعي كه متشكل از مونو ساكاريد ها و دي ساكاريد هاي مختلف است به عنوان ماده ي سرما محافظ جايگزين ساكارز، در انجماد بلاستوسيست موش استفاده شد. بدين منظور بلاستوسيست هاي درون تني موش پس از استحصال، به طور تصادفي به دو گروه انجمادي عسل و ساكارز تقسيم گشتند. در بخش اول آزمايش، بلاستوسيست ها تحت انجماد با محيط هاي حاوي غلظت هاي مختلف عسل قرار گرفتند و در نهايت غلظت هاي بهينه تعيين شدند. بخش دوم به مقايسه ي تاثير محلول هاي انتخاب شده و محيط هاي حاوي ساكارز بر نرخ زنده ماني، خروج از زونا و لانه گزيني اختصاص يافت. در بخش اول، غلظت هاي بهينه ي 1 و 2 مولار به ترتيب در محيط انجماد و ذوب برگزيده شدند. نتايج حاصل از بخش دوم آزمايش نشان داد كه استفاده از عسل طبيعي نه تنها در ميزان زنده ماني توانست با گروه ساكارز برابري نمايد، بلكه قادر به حفظ نرخ خروج از زونا و مهم تر از آن لانه گزيني در سطح گروه ساكارز نيز بود. با توجه به نتايج حاصل از اين تحقيق مي توان عسل طبيعي را به عنوان ماده ي سرمامحافظ نفوذ ناپذير مناسبي جهت جايگزيني با ساكارز و بهينه سازي روند انجماد معرفي كرد.

Vitrification process optimization، as a way to store embryos derived from assisted reproductive techniques، requires dealing with several destructive factors. The presence of carbohydrates as non-permeating cryoprotectants is an attempt in order to reduce these stresses. Since the combination use of sugars leads to better results، in this project، natural honey which consists of various monosaccharides and disaccharides was applied as an alternative to sucrose in mouse blastocyst vitrification. For this purpose، the first part of the experiment was conducted to determine the optimum concentration of honey in vitrification and warming solutions. The second part was designed to compare the effect of honey-based selected solutions and sucrose-based one in terms of survival، hatching and implantation rate. Among different concentrations of honey، optimum concentrations of 1 and 2 M were chosen for vitrification and thawing mediums، respectively. Results of the second part demonstrated that، not only the survival rate can be equal with sucrose when using honey، but it also brings about as good results as the sucrose-based group regarding the hatching rate and more importantly the implantation rate. Therefore، we can introduce natural honey، as an appropriate substitute for sucrose to optimization the vitrification process.