مقايسه دو پروتكل القايي براي تمايز سلول هاي بنيادي مشتق از بافت چربي انسان به سلول هاي پيش ساز اليگودندروسيت

Comparison of two protocols for induction of differentiation of human adipose derived stem cells into oligodendrocyte progenitor cells

زمينه و هدف: مولتيپل اسكلروزيس(MS) يك بيماري اتوايمن تخريب كننده ميلين است كه سيستم عصبي مركزي را تحت تاثير قرار مي دهد. اين مطالعه با هدف ارائه يك روش ساده، كارامد و كوتاه مدت در تمايز سلول هاي بنيادي مشتق از بافت چربي انسان به سلول هاي پيش ساز اليگودندروسيتي به منظور دستيابي به يك جمعيت همگني از اين سلول ها انجام شد. روش بررسي: بعد از جداسازي سلول هاي بنيادي، تمايز سلولي به دو روش و با استفاده از اجسام شبه جنيني و سلول هاي شبه اكتودرمي انجام شد. قابليت زيست پذيري سلولها با استفاده از روش MTT و درصد سلول هاي بيان كننده ماركر هاي Olig2 و A2B5با كمك ايمونوسيتوشيمي مشخص گرديد. همه ي داده ها با استفاده از نرم افزار SPSS و با آزمون آماري Independent- Samples T Test آناليز شدند. يافته ها: نتايج نشان داد كه درصد بالايي از سلول هاي بنيادي، ماركرهاي CD90 و CD105و درصد پاييني از آنها ماركرهاي CD45 و CD14 (ماركرهاي سلول هاي خونساز) را بيان كردند. بعلاوه ميانگين درصد سلول هاي بيان كننده ماركرهاي اليگودندروسيتي پيش ساز (Olig2 و (A2B5 در دو گروه متفاوت بود (0/031=P). علاوه بر اين، مقايسه قابليت زيست پذيري سلولها نشان داد كه ميانگين جذب نوري در سلول هاي تمايز يافته با منشاء اجسام شبه جنيني نسبت به ساير گروها افزايش يافته است (0/044=P). نتيجه گيري: تمايز سلول هايhADSCs به سلول هاي اليگودندروسيتي پيش ساز با استفاده از اجسام شبه جنيني روشي سريع، كارامد و مقرون به صرفه براي دستيابي به يك جمعيت همگني از اين سلول ها مي باشد.

Background and Aim: Multiple sclerosis (MS) is an autoimmune demyelinating disease which affects central nervous system (CNS). The aim of this study was to provide a simple, short term and efficient method for differentiation of human adipose tissue-derived stem cells (hADSCs) into oligodendrocyte precursor cells in order to provide a homogeneous population of these cells. Materials and Methods: After stem cell isolation, cell differentiation was performed by two methods using embryoid body and ectodermal-like cells. The cell viability was evaluated by MTT assay and the mean percentage of differentiated cells expressing Olig2 and A2B5 markers was determined by using immunocytochemistry techniques. Data were analyzed by independent- samples t- Test. Results: The results showed that a high percentage of stem cells expressed CD90 and CD105 markers and a low percentage of them expressed CD14 and CD45 markers (hematopoietic cell markers). In addition, the mean percentages of the cells which expressed oligodendrocyte progenitor cells markers (Olig2 and A2B5) were different in the two groups (P=0.031). Moreover, comparison of cell viability showed significant light absorbance by the cells differentiated from embryoid body compared to the other groups (p = 0.044). Conclusion: The differentiation of human adipose derived stem cells into oligodendrocyte progenitor cells using embryoid body is a rapid and efficient method in order to provide a homogeneous population of these cells.