شناسايي اوره آ پلاسما اوره آ ليتيكوم در نمونه هاي كلينيكي مايع مني مردان نابارور با استفاده از روش مولكولي

Detection of Ureaplasma urealyticum in Clinical Semen Samples in Infertile Men Using Molecular Method

سابقه و هدف: اوره آپلاسما اوره آليتيكوم جزء شايع‌ترين عوامل ايجادكننده اورتريت غيرگونوكوكي بوده كه عفونت بدون علامت باليني ناشي از اين باكتري مي‌تواند سبب سوء عملكرد غدد جنسي و حضور آن در مايع مني سبب افت در ميزان باروري شود. هدف از اين مطالعه، شناسايي اوره آپلاسما اوره آليتيكوم در مايع مني مردان نابارور با بهره‌گيري از روش PCR به عنوان روشي دقيق، با توجه به اهميت موضوع ناباروري مي‌باشد. مواد و روش‌ها: تست PCR جهت شناسايي اوره آپلاسما اوره آليتيكوم ابتدا با استفاده از سوش استاندارد، بهينه و سپس به لحاظ ويژگي و حد تشخيص بررسي شد. نمونه‌هاي مايع مني از 100 مرد نابارور اخذ و به دو بخش به منظور آناليز اسپرم و نيز تستPCR تقسيم گرديد. استخراج DNA با روش فنل- كلروفرم و تست PCR جهت شناسايي اوره آپلاسما اوره آليتيكوم به انجام رسيد. يافته‌ها: از مجموع 100 نمونه مايع مني مردان نابارور مورد مطالعه، 16 نمونه (16 درصد) از نظر وجود اوره آپلاسـما اوره آليتيكوم مثبت و اين دسـته از نمونه‌ها با توجه به نتايج حاصله از اسـپرموگرام از نظر تعداد لوكوســيت بالاتر از حــد نرمـال (Mil/ml 1-0) گزارش شدند. استنتاج: غربالگري زوج هاي نابارور بدون علائم باليني و درمان به موقع آنتي‌بيوتيكي آن‌ها نقش مهم و به‌سزايي در درمان ناباروري دارد، لذا تكنيك PCR به عنوان يك روش تشخيصي با ارزش و قابل اعتماد جهت تشخيص اين باكتري مطرح شده است.

Background and purpose: Ureaplasma urealyticum is one of the most common causes of Non-Gonococcal Urethritis (NGU). Asymptomatic clinical infection caused by this bacterium can cause malnutrition of the sexual attachment glands and its presence in semen contributes to lower fertility. The aim of this study was to identify Ureaplasma urealyticum in semen of infertile men using PCR method as an accurate diagnostic method. Materials and methods: The PCR test was optimized by standard strain to detect Ureaplasma urealyticum and then was studied in terms of specificity and limit of detection (LOD). Semen samples were collected from 100 infertile men and each sample was divided into two parts: the first part was tested by semen analysis and the second part was tested by PCR method. DNA was extracted using phenol-chloroform method and the PCR test was done for detection of Ureaplasma urealyticum. Results: Among the semen samples, 16 cases (16%) were found to be positive for Ureaplasma urealyticum. According to the spermogram test, the leukocyte level was also more than normal level in these samples (0-1 Mil/ml). Conclusion: Screening of infertile couples for Ureaplasma urealyticum infection in those without clinical symptoms, thereby performing timely antibiotic therapy play key roles in treatment of infertility. Hence, PCR method is introduced as a valuable and reliable technique to identify Ureaplasma urealyticum.