رديابي و شناسايي فيتوپلاسماي همراه با بيماري زوال گلابي و پسيل گلابي (Cacopsylla pyricola) در استان‌هاي فارس و خراسان رضوي

Detection and identification of the phytoplasma associated with pear decline disease and the pear psylla, Cacopsylla pyricola in Fars and Khorasan-e-Razavi provinces

در بازديدهاي سال‌هاي 1386 تا 1391 در باغ‌هاي گلابي استان‌هاي خراسان رضوي و فارس علائم زوال گلابي مشاهده گرديد. در آزمون‌هاي PCR دو مرحله‌اي با استفاده از جفت آغازگر P1/P7 در دور اول و جفت آغازگرهاي R16F2n/R16R2 و fO1/rO1 در دور دوم، در درختان داراي علائم زوال در باغ‌هاي مشهد و چناران در استان خراسان رضوي و سه منطقه از فارس شامل باجگاه، دشت ارژن و استهبان، پسيل(Cacopsylla pyricola)‌هاي جمع‌آوري‌شده از روي درختان داراي علائم در باغ‌هاي ناسيونال مشهد و باجگاه شيراز و گياهان مايه‌زني‌شده با عامل زوال گلابي به ترتيب قطعاتي به اندازه تقريبي 1200 و 1050 جفت باز از ژن آر. ان. اي. ريبوزومي16S تكثير شد. آزمون‌هاي RFLP واقعي و مجازي نشان داد كه فيتوپلاسما‌هاي رديابي‌شده در درختان گلابي، حشرات پسيل و گياهان مايه‌زني‌شده، با يكديگر و با 'Candidatus Phytoplasma pyri' ، عامل زوال گلابي يكسان مي‌باشند. آناليز فيلوژنتيكي نيز تعلق فيتوپلاسماهاي رديابي‌شده در درختان گلابي و نمونه‌هاي پسيل به'Ca. Phytoplasma pyri' را تأييد كرد. فيتوپلاسماي عامل بيماري زوال گلابي از باغ‌هاي ناسيونال مشهد و باجگاه به ترتيب به عنوان نماينده‌هاي عامل زوال گلابي در استان‌هاي فارس و خراسان رضوي از طريق پيوند به نهال‌هاي گلابي و "به" و از طريق سس به پروانش انتقال داده شد. اين اولين گزارش از وجود فيتوپلاسماي عامل زوال گلابي در پسيل گلابي در ايران و اولين گزارش از بيماري زوال گلابي در استان خراسان رضوي و نقاط جديدي از استان فارس مي‌باشد.

During 2007-2012 surveys, pear decline (PD) symptoms was observed in different pear orchards in Mashhad andChenaran (Khorasan-e-Razavi province), and 11 areas in Fars province. In nested PCR assays using P1/P7 primer pair in the first round and R16F2n/R16R2 and fO1/rO1 primer pairs in the second round, expected fragments of 1250 and 1050 bp, respectively, were amplified from symptomatic naturally infected pear trees, pear psyllid (Cacopsylla pyricola) insects collected on PD affected trees and experimentally inoculated plants. Real and virtual RFLP analyses showed that phytoplasmas detected in naturally decline affected pear trees, inoculated plants and psyllid insects were identical and belonged to 'Candidatus Phytoplasma pyri'. Phylogenetic analysis also confirmed that the detected phytoplasmas are closely related to 'Ca. Phytoplasma pyri'. As representatives of PD phytoplasmas detected in Fars and Khorasan-e-Razavi provinces, respectively, pear decline agents from Bajgah and National orchard were transmitted from PD affected trees to pear and quince young trees by grafting and to periwinkle via dodder inoculation. This is the first report of association of 'Ca. Phytoplasma pyri' with PD disease and psylla insects in Khorasan-e-Razavi and some areas in Fars province, Iran.