عنوان مقاله :
طراحي و ساخت ناقل بياني ژن فعال‌كننده پلاسمينوژن بافتي انساني براي قارچ دكمه‌اي سفيد Agaricus bisporus
عنوان به زبان ديگر :
Design and Construction of Human Tissue Plasminogen Activator Expression Vector for The White Button Mushroom, Agaricus bisporus
پديد آورندگان :
اشرفي، محسن دانشگاه زنجان - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي، زنجان , فارسي، محمد دانشگاه فردوسي مشهد - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي و به نژادي گياهان زراعي، مشهد , ميرشمسي كاخكي، امين دانشگاه فردوسي مشهد - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي و به نژادي گياهان زراعي، مشهد , پروندي، مژگان دانشگاه فردوسي مشهد - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي و به نژادي گياهان زراعي، مشهد
كليدواژه :
قارچ دكمه‌اي سفيد , راه‌انداز gpdII , توالي ترشحي , پروتئين نوتركيب , اينترون
چكيده فارسي :
سيستم گليكوزيلاسيون قارچ دكمه‌اي سفيد مشابهت زيادي با سلول‌هاي پستانداران دارد و سبب شده است تا اين قارچ براي بيان پروتئين‌هاي نوتركيب گليكوزيله، از جايگاه قابل‌توجهي برخوردار گردد. فعال‌كننده پلاسمينوژن بافتي انساني يك پلي‌پپتيد تك‌زنجيره‌اي گليكوزيله است كه سبب از بين رفتن لخته‌هاي خوني مي‌شود. راه‌انداز gpdII نژادهاي IM008 و Holland737 قارچ دكمه‌اي سفيد با استفاده از واكنش زنجيره‌اي پليمراز تكثير و با قرار گرفتن راه‌انداز gpdII نژاد IM008 پيش از ژن گزينشگر hph پلاسميد pCAMBIA1304، سازه pCAMBIAH8 ساخته شد. با انتقال قطعات gLI7 و gLI8 (به ترتيب حاصل اتصال راه‌انداز gpdII نژادهاي Holland737 و IM008 به اينترون شماره هفت ژن gpdII و توالي ترشحي ژن لاكاز 1 مي‌باشند) به سازه pCAMBIAH8، سازه‌هاي بياني p13H87 و p13H88 طراحي و ساخته شدند. سرانجام با ورود ژن tPA به سازه‌هاي p13H88 و p13H87، سازه‌هاي بياني p13H88T و p13H87T ايجاد شدند. سازه‌هاي ايجاد شده را مي‌توان براي توليد tPA و همچنين برنامه‌هاي بهبود نژادي قارچ دكمه‌اي سفيد مورد استفاده قرار داد.
چكيده لاتين :
The similarity of the white button mushroom glycosylation to mammalian cells, caused a significant position to expression of recombinant glycosylated proteins in this mushroom. Human t-PA is a glycosylated protein that degrades the fibrin network formed within blood clots. The gpdII promoter of the button white mushroom strains IM008 and Holland737 were isolated via PCR and the gpdII promoter of the strain IM008 inserted before of hph gene in pCAMBIA1304 plasmid and pCAMBIAH8 constructed. The gLI7 and gLI8 fragments (resulted from connectivity of gpdII promoter of strains Holland737 and IM008, respectively to intron number seven of gpdII gene and laccase1 gene signal peptide) inserted to pCAMBIAH8 and then p13H88 and p13H87 created. Finally the tPA gene cloned to pCAMBIAH88 and pCAMBIAH87 and then p13H88T and p13H87T constructed, respectively. Constructs in this research can be used for tPA production as well as for genetic improvement program of the white button mushroom.
عنوان نشريه :
فناوري زيستي در كشاورزي
عنوان نشريه :
فناوري زيستي در كشاورزي
