عنوان مقاله :
خاموشي همزمان ژن‌هاي تبائين 6- O- دمتيلاز و كدئين O- دمتيلاز در گياه دارويي شقايق با روش القاء ويروسي
عنوان به زبان ديگر :
Co-silencing of Thebaine 6-O-demethylase and Codeine O-demethylase in Papaver somniferum L., Using Virus-Induced Gene Silencing
پديد آورندگان :
نوروزي مقدم، پروين دانشگاه لرستان - دانشكده كشاورزي - گروه زراعت و اصلاح نباتات، خرم‌آباد , اسماعيلي، احمد دانشگاه لرستان - دانشكده كشاورزي - گروه زراعت و اصلاح نباتات، خرم‌آباد , نظريان فيروزآبادي، فرهاد دانشگاه لرستان - دانشكده كشاورزي - گروه زراعت و اصلاح نباتات، خرم‌آباد
كليدواژه :
VIGS , خاموشي ژن , شقايق , بنزوايزوكوينولين
چكيده فارسي :
گياه شقايق تنها منبع تجاري برخي آلكالوئيدهاي مهم دارويي است. دو آنزيم مهم به نام تبائين 6-O-دمتيلاز (Thebaine 6-O-demethylase; T6ODM) و كدئين O-دمتيلاز (Codeine O-demethylase; CODM) در انتهاي مسير بيوشيميايي آلكالوئيدهاي بنزيل ايزوكوينوليني اين گياه وجود دارند. در اين مطالعه فعاليت بياني ژن‌هاي دو آنزيم مذكور با روش VIGS (Virus-Induced Gene Silencing) مورد بررسي قرار گرفت. براي اين منظور، سازه‌اي براساس ناقل TRV2 كه داراي توالي حفاظت شده ژن DIOX (كه مشترك با بخش انتهايي ژن‌هاي T6ODM و CODM) مي‌باشد، طراحي شد. برگهاي اوليه گياه دو تا سه هفته اي كشت شده در گلدان با آگروباكتريوم داراي سازه خاموشي و براي گياهان كنترل با آگروباكتريوم حاوي ناقل TRV2 خالي مايه‌زني شدند. بررسي بيان ژن در سطح نسخه‌برداري با فن Real Time PCR به‌ترتيب نشان‌دهنده كاهش 86 و 87 درصدي بيان ژن‌هاي CODM و T6ODM بود. اين مطالعه اثبات كرد كه VIGS ابزار موثري براي كاهش سطوح نسخه‌هاي ژن‌هاي بيوسنتزي بنزيل ايزوكوينولين‌هاست.
چكيده لاتين :
Papaver somniferum remains the sole commercial source for narcotic and variety of semisynthetic drugs. Thebaine 6-O-demethylase (T6ODM) and codeine O-demethylase (CODM) genes are related the dioxygenase family that occur at the end of biosynthesis of these alkaloids in this plant. For silencing of CODM and T6ODM genes in Papaver somniferum, a TRV2-based construct containing a conserved sequence of DIOX from the coding region of T6ODM and CODM was designed for simultaneously silencing of two mentioned genes. Emerging first leaves of 2 to 3-week-old seedling were infiltrated with Agrobacterium tumefaciens harboring silencing construct, or the empty vector (TRV2) as a control. Analysis of gene expression at the transcript level by real-time quantitative PCR (polymerase chain reaction) technique showed 86 and 87 percent reduction in gene expression of CODM and T6ODM compared with control plants, respectively. This study demonstrated the efficiency of this method for knockdown the transcript levels of specific BIA biosynthetic genes.
عنوان نشريه :
فناوري زيستي در كشاورزي
عنوان نشريه :
فناوري زيستي در كشاورزي
