مطالعه اثرات مهاري تيمار هم‌زمان سيليبينين و اليگونوكلئوتيد CpG-ODN بر بيان ژن‌هاي MMP-2 و TLR-9 در رده سلول‌هاي سرطان كبد

Inhibitory Effect of Coadministration of Silibinin and CpGODN2006 on Metastatic Characteristics (MMP-2 and TLR-9) of Hepatocarcinoma Cell Line

سابقه و هدف: هپاتوسلولار كارسينوما (HCC) سرطاني شايع است و تحريك سيستم ايمني از طريق (TLR - 9 (Toll-like receptors به وسيله 2006 CpG-ODN مي‌تواند در درمان آن كارآيي داشته باشد. هدف اين مطالعه بررسي اثر تيمار هم‌زمان سيليبينين و 2006 CpG-ODN بر رشد و تكثير مدل سلولي HCC مي باشد. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، اثر بازدارندگي دوزهاي متفاوت سيليبينين و 2006 CpG-ODN بر رشد سلول‌هاي 2HepG و تعيين بهترين غلظت براي تيمار هم‌زمان به روش MTT سنجيده شد. ميزان بيان ژن‌هاي MMP2 و TLR9 به روش Real-Time PCR سنجيده شد. فعاليت ماتريكس‌ متالوپروتييناز MMP2 با روش زايموگرافي اندازه‌گيري گرديد. يافته‌ها: به ترتيب، غلظت‌هاي µM 100 و nM 100 از سيليبينين و 2006 CpG-ODN براي انجام تيمار هم‌زمان انتخاب شدند كه اثرات ايستايي شديدي بر رشد سلول داشتند (05/0< P). نتايج Real-Time PCR تفاوت معني‌داري در Ct تكثير ژن‌ها نشان نداد (05/0> P). استنتاج: حتي غلظت‌هاي پايين CpG در اين پژوهش، اثربخشي سيليبينين بر سلول سرطان كبد را به طور مشخصي افزايش داده‌اند. با توجه به اهميت استفاده از دوزهاي پايين دارو و فعال‌سازي مكانسيم‌هاي ايمني، تجويز توام اين دو دارو مي‌تواند چشم‌انداز روشني را براي روش‌هاي درماني تركيبي آينده داشته باشد.

Background and purpose: Hepatocellular carcinoma (HCC) is a most common liver malignancy and TLR9 (Toll-like receptor) is essential for CpG DNA-induced immune responses. The aim of this study was to assess the anti-metastatic effects of combined administration of silibinin and CpG-ODN2006 on human hepatocellular carcinoma HepG-2 cell line model. Materials and methods: Inhibitory effects of various different concentrations of silibinin and CpG-ODN2006 on HepG-2 cells growth and detection of best dosages for simultaneously treatment were assessed by MTT method. Expression of MMP2 and TLR9 genes was analyzed by real- time PCR. Gelatin zymography was used to determine the activity of MMP2. Results: Inhibitory effects of determined concentrations of silibinin (100 μM) and CpG-ODN2006 (100 nM) on HepG-2 cells growth was significant (p<0.05). Real-Time PCR showed no significant differences between Ct of the genes expression analyses. Conclusion: Conclusion: Collectively, the data in this study supports the idea of combined silibinin-CpG administration in hepatic cancer customized therapeutic modalities. However, more investigations to assess immunomodulatory effects and safety analyses would be very informative steps in advance of randomized clinical trials.