اثر سيتوتوكسيك عصاره ديواره بدن خيار دريايي گونه (Holothuria arenicola) بر روي سلولهاي سرطاني ملانومايي

Cytotoxic effect of sea cucumber body wall extract (Holothuria arenicola) on melanoma Cancer

زمينه و هدف: خيار دريايي در اغلب اكوسيستم هاي دريايي جزء مهمي از اكوسيستم هاي آبي به شمار مي آيد. ملانوما به عنوان خطرناك ترين فرم سرطان پوست، مدتهاي مديدي است كه بشر را تحت تاثير قرار مي دهد. در پژوهش حاضر اثر سيتوتوكسيك عصاره ديواره ي بدن خيار دريايي گونه Holothuria arenicolaبر روي سلولهاي سرطاني ملانوما بررسي شده است. روش بررسي:در اين پژوهش تجربي آزمايشگاهي رده ي سلولي ملانوماي موشي در محيط كشتRPMI 1640(Roswell Park Memorial Institute)10 % در دماي 37 درجه ي سانتيگراد و 5%دي اكسيد كربن كشت شدند. بعد از 24 ساعت سلولها با غلظت هاي مختلف عصاره ي تام ديواره ي بدن خيار دريايي (15، 31، 62، 125، 250 و 500 ميكروگرم بر ميلي ليتر) تيمار شدند. اثر سيتوتوكسيك عصاره خيار دريايي توسط روش(MTT (3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide،رنگ آميزي اكريدين اورنج/ پروپوديوم ايدايد،(DAPI (4, 6- Diamidino-2-phenylindole، فلوسيتومتري و آزمون كاسپاز 3و 9 بر سلولهاي سرطاني ملانوماي موشيمورد بررسي قرار گرفت و نتايج با استفاده از نرم افزارSPSS، آزمون آماري ANOVAتست دانكن در سطح p< 0.05 تحليل شد. يافته ها: عصاره ديواره ي بدن خيار دريايي پس از 24 ساعت باInhibitory oncentration)IC50). 31ميكروگرم بر ميلي ليترو به طور معني داري از طريق آپوپتوز موجب القاء سميت سلولي بر سلولهاي سرطان ملانوماي موشي شد اين عصاره در غلظت 62 ميكروگرم بر ميلي ليتر سميت بيشتري را موجب شد طوري كه در حدود 80 درصد سلول ها دچار آپوپتوز شدند. نتيجه گيري: يافته هاي ما نشان داد كه عصاره تام ديواره ي بدن خيار دريايي با دارا بودن اثر سيتوتوكسيك و پيش برنده آپوپتوز بر رده سلولي ملانوماي موشي ، كانديد مناسبي براي تحقيقات ضد سرطان است.

Background and aims: The sea cucumbers were considered as an important component of aquatic ecosystems in more marine ecosystems. Melanoma as the most dangerous form of skin cancer, has long been influenced the human health. In the present study was examined the cytotoxic effect of sea cucumber body wall extract, species of Holothuria arenicola on melanoma cancer cells. Methods: In this in vitro experimental study, melanoma cancer cells were cultured in %10 RPMI 1640(Roswell Park Memorial Institute) medium and incubated at 37˚C with %5 CO2. After 24 h, the cells were treated by sea cucumber extract with different concentrations (15, 31, 62, 125, 250, 500 &mug/ml). The cytotoxic effect of sea cucumber body wall extract were examined by using MTT assay, Acridine Orange/ Propodium Iodide, DAPI staining, flow cytometry and caspase 3, 9 assay on melanoma cancer cells and the results were analyzed by SPSS software, one way ANOVA and Duncan test. Results: Sea cucumber body wall extract were induced cytotoxic effect through apoptosis induction on B16F10 melanoma cancer cells after 24 h treatment with IC50= 34 µg/ml. This extract were exerted more toxicity in concentration of 62 µg/ml as a result around 80% of the cells were apoptotic. Conclusion: Our findings indicated that the sea cucumber body wall extract with cytotoxic and pro apoptosis activity in B16F10cell line can be a good candidate for anti-cancer researches.