بررسي ژن HER3 به روش RT-PCR در نمونه هاي افراد مبتلا به سرطان پستان

HER3 Gene Expression Study by RT-PCR in Patient with Breast Cancer

مقدمه: امروزه سرطان پستان شايعترين سرطان در بين زنان و در عين حال مهمترين بيماري ها در سراسر جهان مي باشد. تحقيقات گسترده اي در جهت پيشگيري و درمان سرطان صورت مي گيرد. HER3 يكي از پروتئين هاي متصل به غشا مي باشد كه توسط ژن ErbB3 كدگذاري مي شود و تنها پس از هترودايمر شدن با ديگر اعضاي خانواده مي تواند فسفريله و فعال شود. هدف از اين مطالعه بررسي بيانHER3 به عنوان يك فاكتور احتمالي دخيل در گسترس سرطان پستان مي باشد. روش بررسي: در اين مطالعه موردي- شاهدي 20 نمونه بافت پارافينه سرطان پستان و 20 نمونه بافت پارافينه سالم از بيمارستان مهر در سال 92 جمع آوري شد و بيان HER3 به روش كيفي RT-PCR بر روي نمونه ها انجام گرفت. براي اين منظور ابتدا استخراج RNA از بافت توسط محلول RNX و به دنبال آن cDNA ساخته شد. تست RT-PCR ويژه HER3 بهينه و محصول PCR بر روي ژل آگارز مورد بررسي قرار گرفت. يافته ها: در 70% نمونه هاي افراد بيمار، بيان ژن HER3 با توجه به حضور باند بر روي ژل آگارز مشاهده شد و در 30% از نمونه ها باند اختصاصي مشاهده نگرديد، همچنين در 20% از نمونه هاي نرمال، محصول PCR مشاهده و در 80% از نمونه ها هيچ باندي مشاهده نشد. نتيجه گيري: با توجه به نتايج مي توان بيان نمود كه بيان ژن HER3 در بافت افراد مبتلا به سرطان پستان نسبت به افراد نرمال افزايش مييابد. عدم بيان اين ژن در نمونه هاي نرمال و بيان آن در نمونه هاي بيمار احتمال دخالت اين عامل را در پيشرفت و توسعه بيماري مطرح مي كند و به نظر ميرسد كه افزايش بيان HER3 در ابتلا و پيشرفت بيماري نقش داشته و بررسي نقش اين فاكتور در درمان ضروري به نظر مي رسد.

Introduction: Today, cancer is the most common and important diseases worldwide which extensive research is done to prevent and treat cancer. HER3 is a membrane- bound protein that is encoded by ErBB3 gene. After heterodimerization with other family members it can be phosphorylated and activated. The aim of this study was HER3 expression investigation as a factor involve in the spread of breast cancer. Methods: In this study 20 breast cancer and 20 healthy paraffin embedded tissue samples were collected from Mehr Hospital of Tehran in Jan up to Sep 1392. RNA was extracted from tissue samples by RNX solution, and then cDNA synthesis was carried out by Rnadom Hexamer and oligo dT primers and MMULV enzyme. After that PCR reactions were optimized for HER3 gene by using specific primers. PCR products were determined by electrophoresis in Agarose gel. Results: Her3 gene expression in 70% of patients samples due to the presence of bands observed on agarose gel and specific band were not observed in 30% of samples. In addition to, in 20% of normal samples PCR product were observed but in 80% of normal samples band didn’t observe. Conclusion: on the base of results it could be said that ErbB3 expression is increased in breast cancer patients. Non- significant over expression in normal samples indicate that increased expression of HER3 is a reliable factor to detect the disease in early stages, or even thought it could be a prognostic factor in breast cancer.