مقايسه الگوي بياني ژن هاي اصلي مسير خود بازآفريني در رده هاي سلول سرطاني، بافت سرطاني و بافت سالم تومور مثانه

The comparison of self-renewal gene expression pattern in cancer cell lines, tumor tissue and normal tissue of the bladder tumor

زمينه و هدف: يكي از دلايل ايجاد سرطان، بيان نا به جاي ژن هاي كنترل كننده مسير خود بازآفريني در سلول سرطاني است، لذا در اين مطالعه بيان ژن هاي اصلي كنترل كننده مسير خود بازآفريني شامل OCT4، NANOG، KLF4، SOX2 و Nucleostemin در دو رده سلولي 5637 و HT1376، بافت سرطاني و بافت سالم نمونه هاي بيوپسي بافت سرطاني مثانه، مورد بررسي قرار گرفت. روش بررسي: در اين مطالعه آزمايشگاهي، رده هاي سلولي در فلاسك هاي كشت و محيط كشت كامل RPMI1640 كشت و نگه داري شدند و نمونه هاي بيوپسي بافت سرطان از ميان نمونه هاي سرطاني ارسالي به آزمايشگاه پاتولوژي و به صورت بافت تازه، با توجه به علائم باليني و يافته هاي آزمايشگاهي، انتخاب و مورد بررسي قرار گرفتند. حاشيه هاي نمونه هاي بيوپسي به عنوان بافت سالم انتخاب گرديد. بيان ژن هاي مورد نظر در سطح بيان mRNA در دستگاه Real-Time PCR تعيين و با فرمول ct∆∆ مورد آناليز قرار گرفته بصورت ميزان تغيير بيان ژن (Fold change) ارائه گرديد. يافته ها: ارزيابي نتايج Real-Time PCR نشان داد ژن هاي مورد مطالعه در رده هاي سلول سرطاني و نيز بافت سرطاني توده هاي بيوپسي سرطاني مورد مطالعه بيان مي شوند در حاليكه در بافت سالم توده هاي بيوپسي مورد اشاره، بيان اين ژنها مشاهده نمي شود. نتيجه گيري: بيان ژن هاي OCT4، NANOG، KLF4، SOX2 و Nucleostemin لازمه القاء توان خود بازآفريني است. نتايج اين تحقيق نشان مي دهد اين ژن ها در بافت سرطاني و رده هاي سلول سرطاني در مقايسه با بافت سالم بيان بالاتري از خود نشان مي دهند. لذا به نظر ميرسد مطالعه علت فعال شدن مجدد اين ژنها ميتواند در شناسايي ماهيت سرطان كمك كننده باشد.

Background and aims: Re-expression of self-renewal genes is one of the causes of cancer. So, expressional profile of self-renewal genes including, OCT4, NANOG, KLF4, SOX2 and Nucleostemin in two cell lines (5637 and HT1376), cancer and normal tissues of five bladder cancer biopsy tissues were analyzed. Methods: In this experimental study, the cell lines were cultured in RPMI1640 medium. Cancer tissue samples were selected from samples referred to the pathology laboratory, according to clinical symptoms and laboratory findings. Tissue edges were selected as healthy tissue. Expressional profile of interested genes (mRNA expression) was carried down by Real-Time PCR, data were analyzed by ∆∆ct formula and expressional rate reported as fold changes. Results: The Real-Time PCR results showed that the expression of studied genes in cancer cell lines and tumor tissues were down by similar pattern but did not expressed in healthy tissue. Conclusion: The expression of OCT4, NANOG, KLF4, SOX2 and Nucleostemin genes were necessary for induction of self-renewal potency. The results showed that these genes were expressed in cancer tissue and cancer cell lines in compared to normal tissues. The investigation of re-expression of mentioned genes is recommended.