تشخيص اسينتوباكتر بائوماني با استفاده از روش PCR-ELISA

Detection of Acinetobacter baumannii by PCR-ELISA method

زمينه و هدف: اسينتوباكتر بوماني عامل عفونت هاي دستگاه تنفسي، دستگاه ادراري، خون و زخم ها به خصوص در بخش مراقبت هاي ويژه مي باشد و توانايي كسب مقاومت دارا مي باشد. به منظور تشخيص به موقع و پيگيري فرايند درمان اين عفونت ها، لازم است كه تكنيك ها به طور مستمر اصلاح شوند. با توجه به اينكه تاكنون مطالعه اي در زمينه شناسايي و جداسازي اين باكتري در نمونه هاي باليني در ايران با روش PCR-ELISA انجام نشده است، اين مطالعه با هدف جداسازي اسينتوباكتر بوماني با روش PCR-ELISA انجام شده است. روش بررسي: در اين تحقيق روش PCR-ELISA با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي و پروب بر روي سويه استاندارد مورد بررسي قرار گرفت. بعد از تكثير و نشاندار كردن توالي ژن gltA، محصول نشاندار در كف ميكرو پليت كوت گرديد و با استفاده از آنتي بادي ضد ديگوكسي ژنين كانژوگه با پراكسيداز شناسايي شد. يافته ها: بررسي توالي bp722 از بخش حفظ شده ژن gltA اسينتوباكتر بائوماني و نتايج حاصل از مطالعه بر روي اين باكتري با استفاده از روش PCR-ELISA و به كارگيري آغازگرها و پروب نشان داد كه اين روش علاوه بر دقت و حساسيت، براي تشخيص سريع باكتري مناسب است. نتيجه گيري: نتايج حاصل، حاكي از حساسيت بيشتر و سرعت بالاي روش PCR-ELISA در مقايسه با PCR معمولي است. اين تكنيك همچنين علاوه بر سهولت بررسي تعداد بيشتر نمونه، از خطر كمتري نسبت به روش PCR معمولي برخوردار است.

Background and aims: AcinetobacterBaumannii causes infections such as respiratory tract, urinary tract and blood and wounds infections; especially in intensive care units around the world and it has ability to acquire drug resistance. In order to recognize and track the treatment of these infections, techniques should continuously be modified. Up to now the investigation has not done on the identification and isolation of the bacteria in clinical samples by PCR-ELISA method in Iran, this study was performed to isolate Acinetobacterbaumannii by PCR-ELISA method. Methods: In this study, standard strains were evaluated using specific primers and probes by PCR-ELISA method. After amplification and labeling gltA gene, labeled products were coated in micro plates and detected using antibodies against digoxigenin conjugated with peroxidase. Results: The results of PCR-ELISA method showed that 722 bp fragment from conserved gltA gene. This method is a rapid and sensitive method for the detection of bacteria by using specific primer and probs. Conclusion: The results indicated that PCR-ELISA possesses a greater sensitivity faster in comparison with conventional PCR. This technique also facilitates the investigation more samples easily and the risk of applying this methods is lower than conventional PCR.